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warkan

金虫 (正式写手)

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[求助] 引物错配问题请教已有3人参与

19bp的引物在中间和3‘端各一个错配能否扩增出目的条带，想要通过PCR鉴定“点突变”

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1楼 2015-05-24 20:47:35

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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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【答案】应助回帖

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点突变可以啊，只是对PCR扩增特异性要求较高，注意使用特异性高的试剂

todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful

2楼2015-05-25 09:47:11

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erland21411

铁虫 (小有名气)

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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

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这个要看你使用的酶和模板吧，比如用质粒做模板的时候应该就可以扩增出来，但是用cDNA做模板就不一定了。

3楼2015-05-25 12:25:30

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feng890327

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

建议楼主把引物设计长一点，引物越短越容易发生错配，产生特异性扩增，至少要在30bp以上吧

4楼2015-05-25 14:19:57

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