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nxyangbei

新虫 (初入文坛)

[求助] 条带拖尾问题 已有3人参与

求大神帮助!!分子量:110Kda,分离胶7.5%,浓缩胶4%。80V跑浓缩胶,120V跑分离胶。上样量48ug。抗体是ABcam单克隆一抗。为什么条带如此拖尾?

条带拖尾问题
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倩女

金虫 (正式写手)

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不知道你的浓缩胶有多高,还有你的上样量有多少微升。建议将浓缩胶适当的高一些,最好是等到样品能够压缩成为一条直线后进入分离胶。
2楼2015-05-20 05:58:18
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nxyangbei

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 倩女 at 2015-05-20 05:58:18
不知道你的浓缩胶有多高,还有你的上样量有多少微升。建议将浓缩胶适当的高一些,最好是等到样品能够压缩成为一条直线后进入分离胶。

上的5ul。浓缩胶大概有2cm多~唉
3楼2015-05-20 09:01:50
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你好像在丁香园上也发了这个问题吧
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
4楼2015-05-20 10:42:00
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十七--十七

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上样量是48ug,还是5ul?要是48的话,大了一倍,要是5的话,你用的微量进样器的量程是?
5楼2015-05-20 10:59:06
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nxyangbei

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 十七--十七 at 2015-05-20 10:59:06
上样量是48ug,还是5ul?要是48的话,大了一倍,要是5的话,你用的微量进样器的量程是?

因为我用的是15孔梳,上样的微升数不能太大。所以就上了5微升,但蛋白量是48ug。用的0.5-10ul枪
6楼2015-05-20 15:39:21
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nxyangbei

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-05-20 10:42:00
你好像在丁香园上也发了这个问题吧

恩恩。太着急了
7楼2015-05-20 15:48:38
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十七--十七

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by nxyangbei at 2015-05-20 15:39:21
因为我用的是15孔梳,上样的微升数不能太大。所以就上了5微升,但蛋白量是48ug。用的0.5-10ul枪...

蛋白浓度是48ug/ul,蛋白量为240ug;还是5ul的量为48?要是前者,建议降低浓度三到四倍。
8楼2015-05-20 19:51:02
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nxyangbei

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 十七--十七 at 2015-05-20 19:51:02
蛋白浓度是48ug/ul,蛋白量为240ug;还是5ul的量为48?要是前者,建议降低浓度三到四倍。...

恩恩,是5ul的量是48ug
9楼2015-05-21 08:48:55
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十七--十七

银虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by nxyangbei at 2015-05-21 08:48:55
恩恩,是5ul的量是48ug...

多次试验
10楼2015-05-21 10:02:56
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