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吴金连123

银虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE电泳可是跑出来的电泳图条带总是歪的，是曲线的，这是为什么？

SDS-PAGE电泳可是跑出来的电泳图条带总是歪歪的，成曲线状的，这是为什么？什么原因呢？
是否跟Tris-c l有关？还是电泳缓冲液的问题？
SDS-PAGE电泳可是跑出来的电泳图条带总是歪的，是曲线的，这是为什么？
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1楼 2014-05-28 17:18:55
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★ ★
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youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-31 14:31:31
蛋白质电泳带歪曲的原因与改进方法（凌波丽，2014年7月28日）

1.蛋白质电泳带形成“ 微笑”（两边翘起中间凹下）的原因与解决方法？
主要是由于：电泳冷却系统形成温度梯度。
处理办法：改善电泳冷却系统，配制凝胶时充分抽气，待其充分凝固再作后续实验。
2.蛋白质电泳带形成“皱眉”（两边向下中间鼓起）的原因与解决方法？
主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法：可在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。比较靠边的气泡可以用较长的注射针吸取，先玻璃板与凝胶之间缝隙紧贴玻璃板进针，不要撬动玻璃板或者插入凝胶。
3.蛋白质电泳带形成兼有“ 微笑”与“皱眉”（波浪形或者不规则形状）的原因与解决方法。
主要是由于：凝胶中的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺溶解性不好；配制凝胶时，充分抽气不充分，聚合后凝胶孔径不均匀或者陷入气泡；凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中；梳子拔出太早或者用力过大，导致点样孔损坏。
处理办法：丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺应该新鲜且按说明书配置，适当混合均匀；配制凝胶时充分抽气，待其充分凝固再作后续实验；电泳模具的两块玻璃板需保持平行；梳子拔出不宜太早，应待凝胶凝固，小心拔出，保持点样孔完好。

仅供参考。
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13楼2014-07-29 10:17:40
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atonement

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
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youlinglyw: 金币+2 2014-07-31 14:29:53
如果各个航道（lane）的上样量、上样浓度不一样，可能会跑成“笑脸”型或“√”型；
试试各个航道都跑同一个样品，上样量也一样，如果还这样那可能是别的问题了。
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2楼2014-05-28 20:33:04
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Jerry66

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
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youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-31 14:30:03
1. sample?е??}??????
2. ???u?z?w??buffer pH?????}
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大海好
3楼2014-05-29 08:32:44
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365634307

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-31 14:30:10
你制胶应该不均匀，另外分离胶可以少一些，浓缩胶再稍微多一些，跑的速度太快了，调节一下电流。希望对你有帮助！

[ 发自小木虫客户端 ]
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獻上‵（*∩_∩*）′再长的路，一步步也能走完，再短的路，不迈开双脚也无法到达。
4楼2014-05-29 08:54:56
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吴金连123

银虫 (初入文坛)
???????:
3?: Originally posted by Jerry66 at 2014-05-29 08:32:44
1. sample?е??}??????
2. ???u?z?w??buffer pH?????}

??????????п?????????????????????pH???????
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5楼2014-05-29 20:11:09
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吴金连123

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 365634307 at 2014-05-29 08:54:56
你制胶应该不均匀，另外分离胶可以少一些，浓缩胶再稍微多一些，跑的速度太快了，调节一下电流。希望对你有帮助！

谢谢
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6楼2014-05-29 20:11:32
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dxd1219

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-31 14:31:10
最大可能就是胶配的不好 不均匀
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在哪儿跌倒就在哪儿歇会儿……
7楼2014-05-30 16:22:51
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79377

新虫 (初入文坛)
盐离子浓度过高

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2014-05-31 10:41:10
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吴金连123

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 79377 at 2014-05-31 10:41:10
盐离子浓度过高

可是我用Tris-cl 缓冲液，一直跑也没问题，就是突然间出现这问题 了
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9楼2014-06-03 18:32:23
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gongzilu

木虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
分离胶浓缩胶可以重新配制了。
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吴金连123
10楼2014-06-04 17:17:51
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