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吴金连123

银虫 (初入文坛)

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[交流] SDS-PAGE电泳可是跑出来的电泳图条带总是歪的，是曲线的，这是为什么？

SDS-PAGE电泳可是跑出来的电泳图条带总是歪歪的，成曲线状的，这是为什么？什么原因呢？
是否跟Tris-c l有关？还是电泳缓冲液的问题？

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1楼 2014-05-28 17:18:55

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凌波丽

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youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-31 14:31:31

蛋白质电泳带歪曲的原因与改进方法（凌波丽，2014年7月28日）

1.蛋白质电泳带形成“ 微笑”（两边翘起中间凹下）的原因与解决方法？
主要是由于：电泳冷却系统形成温度梯度。
处理办法：改善电泳冷却系统，配制凝胶时充分抽气，待其充分凝固再作后续实验。
2.蛋白质电泳带形成“皱眉”（两边向下中间鼓起）的原因与解决方法？
主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法：可在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。比较靠边的气泡可以用较长的注射针吸取，先玻璃板与凝胶之间缝隙紧贴玻璃板进针，不要撬动玻璃板或者插入凝胶。
3.蛋白质电泳带形成兼有“ 微笑”与“皱眉”（波浪形或者不规则形状）的原因与解决方法。
主要是由于：凝胶中的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺溶解性不好；配制凝胶时，充分抽气不充分，聚合后凝胶孔径不均匀或者陷入气泡；凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中；梳子拔出太早或者用力过大，导致点样孔损坏。
处理办法：丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺应该新鲜且按说明书配置，适当混合均匀；配制凝胶时充分抽气，待其充分凝固再作后续实验；电泳模具的两块玻璃板需保持平行；梳子拔出不宜太早，应待凝胶凝固，小心拔出，保持点样孔完好。

仅供参考。