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新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
9楼: Originally posted by 吴金连123 at 2014-06-03 18:32:23
可是我用Tris-cl 缓冲液,一直跑也没问题,就是突然间出现这问题 了...

有可能是样品中的盐浓度过高,前面已经有人提到了

[ 发自小木虫客户端 ]
11楼2014-06-04 22:30:13
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吴金连123

银虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by gongzilu at 2014-06-04 17:17:51
分离胶浓缩胶可以重新配制了。

刚刚重新配了,可是还是歪歪曲曲的,好郁闷
想问下是不是分离胶浓缩胶缓冲液的pH对此有很大的影响?我在怀疑是不是pH计的问题
12楼2014-06-05 22:53:43
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

★ ★ ★ ★
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youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-31 14:31:31
蛋白质电泳带歪曲的原因与改进方法(凌波丽,2014年7月28日)

1.蛋白质电泳带形成“ 微笑”(两边翘起中间凹下)的原因与解决方法?
主要是由于:电泳冷却系统形成温度梯度。
处理办法:改善电泳冷却系统,配制凝胶时充分抽气,待其充分凝固再作后续实验。
2.蛋白质电泳带形成“皱眉”(两边向下中间鼓起)的原因与解决方法?
主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法:可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。比较靠边的气泡可以用较长的注射针吸取,先玻璃板与凝胶之间缝隙紧贴玻璃板进针,不要撬动玻璃板或者插入凝胶。
3.蛋白质电泳带形成兼有“ 微笑”与“皱眉”(波浪形或者不规则形状)的原因与解决方法。
主要是由于:凝胶中的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺溶解性不好;配制凝胶时,充分抽气不充分,聚合后凝胶孔径不均匀或者陷入气泡;凝胶的中间部分凝固不均匀所致,多出现于较厚的凝胶中;梳子拔出太早或者用力过大,导致点样孔损坏。
处理办法:丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺应该新鲜且按说明书配置,适当混合均匀;配制凝胶时充分抽气,待其充分凝固再作后续实验;电泳模具的两块玻璃板需保持平行;梳子拔出不宜太早,应待凝胶凝固,小心拔出,保持点样孔完好。

仅供参考。
13楼2014-07-29 10:17:40
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哈姆_雷特

铜虫 (初入文坛)


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是不是你跑胶的时候内槽液液面降低了??
我是干发酵的
14楼2014-07-29 14:15:51
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樱雪诺风

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
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youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-31 14:32:02
条带歪斜,这个看着像是凝胶不均匀,配胶的时候尽量缩短时间,
15楼2014-07-29 15:41:54
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hanyushishe

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-31 14:31:55
可能原因:分离胶倒完没有压胶(水OR异丙醇),造成表面凹凸不平。
16楼2014-07-31 10:41:57
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leqps

木虫 (小有名气)

却实很奇怪
证据
17楼2014-07-31 19:22:17
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一然dudu

新虫 (初入文坛)


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1.跑胶的电压太大
2.制胶时没有用力打,胶没有混匀
18楼2017-12-28 20:25:58
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萌萌小学生

禁虫 (小有名气)


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19楼2017-12-31 22:38:01
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