应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 实时荧光定量PCR之标准曲线的制作
51/1返回列表
查看: 7800  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

十分想念

新虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量PCR之标准曲线的制作 已有2人参与

新手做实时定量PCR，好多东西不懂，大家帮忙看下，我是从标准曲线做起的，前面几次都是做的10个浓度梯度，这一次做的样分别是无菌水空白，180pg/uL的质粒标准品，1.8ng/uL的质粒标准品，但是每个实验一样的情况：无论是水，还是标准品，不论浓度梯度，所有的CT都是25左右，根本没有任何区别，这是为什么啊？求指导

实时荧光定量PCR之标准曲线的制作
9BB4A9C494D9315310A9B880A9716F2A.png


实时荧光定量PCR之标准曲线的制作-1
23D4A85A3CE928E16737D4D998E7EE8D.png


实时荧光定量PCR之标准曲线的制作-2
74F9FC829EB4DDABD3C6546915C73AEF.png


实时荧光定量PCR之标准曲线的制作-3
C98FB2CE3181054EE52412ABCA82D5AD.png


实时荧光定量PCR之标准曲线的制作-4
C4820DED2621281ADD5FC56A7F5B8B47.png


实时荧光定量PCR之标准曲线的制作-5
F1826063B78E8DED7AAFD4F94601F335.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
加油
1楼 2015-05-18 10:01:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

erland21411

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-06-08 13:19:45
你的质粒梯度稀释的时候使用水稀释的？我原来做cDNA梯度的时候用水稀释会有很大误差的。
另外用水做模板的阴性对照CT都在25那反应体系肯定是有污染的，看你的熔点曲线，感觉还是有两个峰，最好换引物。
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-23 22:33:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

十分想念

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2015-05-18 13:35:51
毋庸置疑，污染

只是污染而已吗？那为什么十个浓度梯度的标准品的CT也是一样的，丝毫按照3个CT的差？
赞一下 回复此楼
加油
3楼2015-05-18 20:20:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laplacegsau

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-06-08 13:19:34
是不是引物不对，没有扩增目的片段。无菌水的Ct值其实是引物二聚体
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-23 12:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十分想念

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by laplacegsau at 2015-05-23 12:49:09
是不是引物不对，没有扩增目的片段。无菌水的Ct值其实是引物二聚体

恩，验证过了，是引物的问题，已经换过引物了，谢谢
赞一下 回复此楼
加油
6楼2015-06-08 11:32:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap－ 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭