| 查看: 2220 | 回复: 3 | ||
yajune铁杆木虫 (职业作家)
|
[求助]
荧光定量PCR标准曲线的问题 已有2人参与
|
|
投了篇毒理学的文章，审稿人提出了关于荧光定量PCR的优化问题，我的QPCR就是按照试剂盒进行的，就是所有测的基因都按照一个扩增方法（试剂盒推荐的）就都能扩出来，所以可能也不需要优化吧。但是关于标准曲线的问题，我有点不明白，我的QPCR做的是相对定量，也就是把对照组当作1，然后计算处理组的相对表达值；这种半定量也需要标准曲线么？还是说审稿人指的是扩增曲线呢？下边是审稿人的原话，麻烦比较懂得同学帮我分析一下，谢谢啦 How were the QPCR assays optimised: no details are currently given and the authors state everything was run at the same temperature. What was the efficiency and correlation coefficient for the standard curves in each case? If appropriate validation was not conducted the dataset is not valid. If this was conducted, please add details to the supplemental table. 另外审稿人还提了一个选择内参基因的问题，我用的是beta-actin，但是审稿人貌似觉得这个内参不合适。。。问我是如何证明它的表达是稳定的，这个问题我还真没考虑过，因为我是看大部分文献都以beta-actin为内参，我就理所当然的用了这个，请问一下这个问题从技术上讲有比较好的解决办法么？或者说有什么比较好的回答方法么？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有103人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于荧光定量标准偏差问题
已经有5人回复
- 溶解曲线不好荧光定量pcr的数据就用不了吗？
已经有13人回复
- 荧光定量PCR 扩增曲线求助
已经有24人回复
- 请教荧光定量PCR结果图？我的这张能看出来什么问题？
已经有24人回复
- 求教，荧光定量PCR标曲问题
已经有16人回复
- 急求荧光实时定量PCR内参法实验步骤，最好能给我一篇详细点的论文
已经有14人回复
- 荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么?
已经有15人回复
- 梯度荧光定量的程序如何设置
已经有9人回复
- 荧光定量PCR 溶解曲线
已经有3人回复
- 实时荧光定量PCR过程问题
已经有11人回复
- 荧光定量PCR曲线上翘，没达到平台期
已经有4人回复
- 求助！荧光定量PCR标准曲线制作至少要几个梯度
已经有6人回复
- 绝对定量荧光PCR中做标准曲线的DNA的获得。
已经有10人回复
- 荧光定量pcr溶解曲线好几个峰，但是电泳只有一条目的条带，怎么回事
已经有5人回复
- 一个关于qPCR标准曲线的问题。谢谢！
已经有12人回复
- 荧光pcr标准曲线问题
已经有21人回复
- 荧光定量PCR的扩增曲线很奇怪，什么原因
已经有7人回复
- 荧光定量PCR标准曲线的建立
已经有3人回复
- 标准菌株建立荧光定量PCR的标准曲线
已经有5人回复
- 【求助/交流】普通PCR和荧光实时定量PCR为何结果不同？
已经有4人回复
- 【求助/交流】荧光PCR扩增曲线问题
已经有18人回复
xiemin217
木虫 (正式写手)
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 1841.3
- 红花: 3
- 帖子: 319
- 在线: 190小时
- 虫号: 1319439
- 注册: 2011-06-10
- 专业: 植物生理与生化
2楼2014-10-16 10:04:19
zhangyunjing
金虫 (小有名气)
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 1513.9
- 红花: 7
- 帖子: 202
- 在线: 164.5小时
- 虫号: 1952690
- 注册: 2012-08-23
- 性别: MM
- 专业: 理论法学
3楼2014-10-16 10:16:44
yajune
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 7054.4
- 散金: 19076
- 红花: 11
- 帖子: 3760
- 在线: 177.2小时
- 虫号: 873714
- 注册: 2009-10-16
- 性别: GG
- 专业: 化学环境污染与健康
4楼2014-10-17 01:36:25
