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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于荧光定量标准偏差问题
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15176207886

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于荧光定量标准偏差问题 已有3人参与

小弟最近在做荧光定量 发现ct值重复性比较好 可是ct的标准偏差非常大 请教各位前辈 这可能是什么原因引起的 怎样避免
只有一个金币 新人 支持一下吧 谢谢~
忘了说了 我做的是三个重复 也就是1，2，3是一个样品 4，5，6是另一个样品
关于荧光定量标准偏差问题
IMG_1906.JPG


关于荧光定量标准偏差问题-1
IMG_1907[1].JPG
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1楼 2014-08-17 16:52:32
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vapordw

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用的啥仪器。其他人用的时候结果怎样列？
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2楼2014-08-18 15:15:09
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beautybanana

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2014-08-22 19:53:08
从你扩增重复样品的CT值看, 你实验操作的非常好. 表明人为误差很小, 当然重复扩增的Ct值有差异还和偶然误差有关, 包括移液枪,扩增仪器等误差. 所以Ct值会有较小的差异, 这是不可避免的. 对于重复样品扩增的Ct值数据, 一般是取平均值了, 但也要进行数据分析, 因为有时Ct值可能会相差较大, 这是需要剔除可疑值(即不太准确的值). 关于数据分析, 可疑baidu下格拉布斯准则, 可以用这个准则对重复样得到的数据进行分析.
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3楼2014-08-19 18:57:30
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15176207886

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by vapordw at 2014-08-18 15:15:09
用的啥仪器。其他人用的时候结果怎样列？

我发现问题可能是我将所有的值用同一个标记标注 所以标准偏差算的是所有值的而非三个重复的 从而导致这个值比较大而且所有的数值一样
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4楼2014-08-22 09:41:34
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15176207886

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by beautybanana at 2014-08-19 18:57:30
从你扩增重复样品的CT值看, 你实验操作的非常好. 表明人为误差很小, 当然重复扩增的Ct值有差异还和偶然误差有关, 包括移液枪,扩增仪器等误差. 所以Ct值会有较小的差异, 这是不可避免的. 对于重复样品扩增的Ct值数据 ...

我发现问题可能是我将所有的值用同一个标记标注 所以标准偏差算的是所有值的而非三个重复的 从而导致这个值比较大而且所有的数值一样 谢谢你的建议 非常有用
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5楼2014-08-22 09:43:42
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happydove

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-08-22 19:53:13
建议：模板要纯，稀释要做好，引物特异性好
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6楼2014-08-22 16:08:39
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