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yabing0324

金虫 (职业作家)

[求助] 荧光阀值怎么设定

我用的是bio-rad iQ5,标准曲线绘制出来以后,那个荧光阀值怎么设定,有什么标准,范围在哪里?新手,看说明书,好多专业的名词根本看不懂。。。。请会的人不吝赐教吧,谢谢!我是做绝对定量。
如下图,就是那条绿色的横线。


[ Last edited by yabing0324 on 2011-8-18 at 17:34 ]
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silicare

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优秀版主

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励交流 2011-09-27 16:57:33
系统根据本底自己计算出来的,其实可以自己拖一下
2楼2011-08-18 18:11:17
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yabing0324

金虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by silicare at 2011-08-18 18:11:17:
系统根据本底自己计算出来的,其实可以自己拖一下

谢谢,我还想问下
我该怎么拖,根据扩增效率、相关系数,让它们都更接近理想值,对吗?
拖的范围是不是在曲线刚刚起跳的地方?
3楼2011-08-18 20:13:02
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love_st

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-08-18 20:34:40
yabing0324(金币+3): 2011-08-19 09:00:55
拐点处,两边的切线就是拐点,上面那个阈值明显过高,下面那个再往下拉
4楼2011-08-18 20:25:07
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shuguanggao

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yabing0324(金币+2): 2011-09-27 16:04:22
lstt09nk(金币+5): 鼓励新虫回帖交流 2011-09-27 16:57:55
前15个循环的荧光信号作为本底信号(baseline)。
荧光阈值的默认设置是3到15个循环荧光信号的标准偏差的10倍;
手动设置:大于荧光背景值和阴性对照的荧光最高值,就是进入指数期的最初阶段。
5楼2011-09-26 22:32:05
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