应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 保护性碱基带酶切位点 是不是？
151/2返回列表12下一页
查看: 2371  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

杨仔儿

木虫 (著名写手)

[求助] 保护性碱基带酶切位点 是不是？ 已有7人参与

引物上加了保护性碱基之后，目的基因上还用加酶切位点吗？

对我有帮助的回答10个BB，谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-05-15 14:48:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杨仔儿: 金币+10, ★有帮助 2015-05-16 10:28:25
有些不明白你的问题。引物在5’端加保护碱基的目的是因为克隆目的基因时引入酶切位点后避免位点在末端切割效率降低。如果你克隆目的基因时不加酶切位点，要保护碱基何用？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-05-16 04:33:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flh6078

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杨仔儿: 金币+10, ★★★很有帮助, 说的很明白，受教了 2015-05-16 12:03:18
由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开，因此在设计PCR引物时，人为的在酶切位点序列的5‘端外侧添加额外的碱基序列，即保护碱基，用来提高将来酶切时的活性 。所以设计引物时先加酶切位点，再加保护碱基。酶切位点保护碱基对应表百度就有，下一个就行。还有，楼主应先了解实验原理再开始实验~

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-05-16 10:50:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flh6078

金虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-18 23:10:13
引用回帖:
5楼: Originally posted by 杨仔儿 at 2015-05-16 12:02:51
关键是不知道怎么开始，所以我现在就是做到哪里学到哪里
...

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=8937735
这里有我上传的一个分子实验手册，里面也有这方面的内容，你可以看看，希望对你有帮助
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-05-16 18:44:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2015-05-16 04:33:19
有些不明白你的问题。引物在5’端加保护碱基的目的是因为克隆目的基因时引入酶切位点后避免位点在末端切割效率降低。如果你克隆目的基因时不加酶切位点，要保护碱基何用？

我的意思是保护性碱基和酶切位点是不是在一起

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2015-05-16 10:28:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by flh6078 at 2015-05-16 10:50:24
由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开，因此在设计PCR引物时，人为的在酶切位点序列的5‘端外侧添加额外的碱基序列，即保护碱基，用来提高将来酶切时的活性 。所以设计引物时先加酶切位点 ...

关键是不知道怎么开始，所以我现在就是做到哪里学到哪里

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-16 12:02:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小蚂蚁虫

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杨仔儿: 金币+5 2015-05-16 14:50:44
当然要加酶切位点 不然你加保护碱基又有什么用
赞一下 回复此楼
6楼2015-05-16 14:35:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小蚂蚁虫 at 2015-05-16 14:35:13
当然要加酶切位点 不然你加保护碱基又有什么用

我知道了，谢谢你

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
7楼2015-05-16 14:50:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-18 23:10:40
这两句话有什么关联，最重要的是看你想要怎么做你的实验，如果你只是扩增一条基因看看是否有你需要的条带，加不加位点对你有影响吗？如果你是要克隆一个基因，你不加位点怎么做到目的载体
赞一下 回复此楼
9楼2015-05-18 14:55:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王冠傑

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

http://wenku.baidu.com/link?url= ... 6Zb7OjLIHFhzU4wa9wS
保护碱基表，你一看就明白了。希望对你有帮助。
赞一下 回复此楼
10楼2015-05-18 15:24:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 杨仔儿 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 04:07 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:27 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭