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急!急!急!跑胶没有条带,请问这是因为什么?
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黑西虾虾
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虫号: 2387519
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专业: 环境工程
[
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]
急!急!急!跑胶没有条带,请问这是因为什么?
已有10人参与
我用的酶是ExTaq
体系(50微升):酶 0.5
引物1、引物2:各4
buffer: 5
dntp: 5
水 27.5
模板: 4
这些条件是之前师姐做成功的,可是自己做就是条带没跑出来。请问这是为什么?中间那个环节可能出问题?
1是提取DNA不纯?
2是加药品浓度不够?
3我跑胶时哪里出的问题?
1.png
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【求助/交流】PCR没有条带
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1楼
2015-05-08 17:08:51
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流
2015-05-10 22:56:21
首先,Marker能看到。说明不是电泳的问题。预计pcr产物片段多大。从最下面样品有淡淡的亮,他可能是引物或者二聚体。引物出现降解失效的概率很小。所以问题出现在pcr扩增。。。。
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13楼
2015-05-09 22:40:10
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【答案】应助回帖
还有就是引物浓度是多少。50ul加4ul过多了。模板加了4ul。。。。这个也太多了但是电泳看不见模板的条带。不知道模板检测过没有。。如果模板确定有。引物没问题。酶没有坏。可能就是tm值的问题
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14楼
2015-05-09 22:43:11
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