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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助：Native gel蛋白条带总是跑不出来
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ciciy_7979

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：Native gel蛋白条带总是跑不出来

蛋白分子量18KDa，PI 5.3,磷酸化后跑native gel，怎么也看不到2条清晰的条带，同样的样品跑公司买的胶条带连成片，跑自己制的胶只有一条带而且看起来像沉淀在两侧。

这个蛋白不溶于水，样品里有4M Urea，不明白为什么还会沉淀。求高手帮忙分析一下。

求助：Native gel蛋白条带总是跑不出来
NATIVE 2.jpg


求助：Native gel蛋白条带总是跑不出来-1
NATIVE 3.jpg


求助：Native gel蛋白条带总是跑不出来-2
NATIVE 1.jpg
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1楼 2014-11-19 01:08:01
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lpzl

木虫 (正式写手)
同求，学习下。。。。请教楼主native gel怎么配置的？？？？
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-11-19 08:46:55
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ciciy_7979

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2014-11-19 08:46:55
同求，学习下。。。。请教楼主native gel怎么配置的？？？？

我是参考网上的方法做的，http://www.assay-protocol.com/molecular-biology/electrophoresis/native-page。

方法和SDS胶一样，但是溶液的配方不一样。你可以多参考几家，不同公司给的native gel配方也不用，但是原理一样。
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3楼2014-11-19 22:50:52
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lpzl

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ciciy_7979 at 2014-11-19 22:50:52
我是参考网上的方法做的，http://www.assay-protocol.com/molecular-biology/electrophoresis/native-page。

方法和SDS胶一样，但是溶液的配方不一样。你可以多参考几家，不同公司给的native gel配方也不用，但 ...

OK .多谢了，我去试试。。。
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
4楼2014-11-20 09:14:58
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