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普鲁旺斯花季

银虫 (小有名气)

[求助] 用质粒DNA小量提取试剂盒提pET-28a质粒,maker,1kb 已有4人参与

pet-28a质粒不是在5000多有条带吗,我提的怎么都大于10000了,还没做酶切,这什么原因啊
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普鲁旺斯花季

银虫 (小有名气)

图片,左右边maker 1kb
用质粒DNA小量提取试剂盒提pET-28a质粒,maker,1kb
IMG_20150501_113921.jpg

一生转而得一夏,当司掌好年华
2楼2015-05-01 13:13:22
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shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你配置的胶浓度高了吧。质粒电泳是从电泳图上反映不出具体真实大小的
从新跑一次
或者酶切鉴定一下不就行了

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-05-01 17:03:43
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laqiwe

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒线性化后跑胶条带更准确
4楼2015-05-01 20:10:12
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普鲁旺斯花季

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by laqiwe at 2015-05-01 20:10:12
质粒线性化后跑胶条带更准确

单酶切了一下,跑胶还可以。
一生转而得一夏,当司掌好年华
5楼2015-05-01 22:06:00
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hkj710

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
根据我的经验判断,应该没有质粒,提取出来的是细菌基因组DNA,最好重新活化你的细菌,再看看
6楼2015-05-04 09:59:03
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bonbonzd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒提取后,一般三条带(按跑胶顺序:开环、线性、闭环)。但试剂盒提取的一般一条带(开环的),比线性(5000bp)跑胶慢。你的质粒应该没问题,单酶切一下就会在5000左右了
7楼2015-05-04 11:39:43
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