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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用质粒DNA小量提取试剂盒提pET-28a质粒，maker,1kb
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普鲁旺斯花季

银虫 (小有名气)

[求助] 用质粒DNA小量提取试剂盒提pET-28a质粒，maker,1kb 已有4人参与

pet-28a质粒不是在5000多有条带吗，我提的怎么都大于10000了，还没做酶切，这什么原因啊
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一生转而得一夏，当司掌好年华
1楼 2015-05-01 12:17:56
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普鲁旺斯花季

银虫 (小有名气)
图片，左右边maker 1kb
用质粒DNA小量提取试剂盒提pET-28a质粒，maker,1kb
IMG_20150501_113921.jpg
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一生转而得一夏，当司掌好年华
2楼2015-05-01 13:13:22
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shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你配置的胶浓度高了吧。质粒电泳是从电泳图上反映不出具体真实大小的
从新跑一次
或者酶切鉴定一下不就行了

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-05-01 17:03:43
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laqiwe

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒线性化后跑胶条带更准确
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4楼2015-05-01 20:10:12
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普鲁旺斯花季

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by laqiwe at 2015-05-01 20:10:12
质粒线性化后跑胶条带更准确

单酶切了一下，跑胶还可以。
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一生转而得一夏，当司掌好年华
5楼2015-05-01 22:06:00
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hkj710

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据我的经验判断，应该没有质粒，提取出来的是细菌基因组DNA,最好重新活化你的细菌，再看看
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6楼2015-05-04 09:59:03
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bonbonzd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒提取后，一般三条带（按跑胶顺序：开环、线性、闭环）。但试剂盒提取的一般一条带（开环的），比线性（5000bp）跑胶慢。你的质粒应该没问题，单酶切一下就会在5000左右了
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7楼2015-05-04 11:39:43
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