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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 质粒里混有空载体怎么办？
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逍遥e宝

铁杆木虫 (正式写手)

我爱黄赌毒

[求助] 质粒里混有空载体怎么办？ 已有5人参与

最近刚大抽的质粒拿去跑了下胶，发现有4条带。。。。。应该是混有空载体了吧？？要想获得纯净的质粒应该怎么办？拿这批质粒去挑单克隆能解决问题木？
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无数老鼠的生命祭奠了我被偷走的那五年---------------forever宝
1楼 2014-03-13 09:52:17
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

547star

木虫 (著名写手)
有时候会出现多于3条带的，不一定是混了别的质粒。
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为什么
2楼2014-03-13 11:29:25
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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-03-14 09:24:54
转化，涂板，重新挑克隆，这个能解决
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4楼2014-03-13 15:56:47
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普通回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-03-14 09:24:49
逍遥e宝: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢~ 2014-03-14 09:39:36
不是吧……可能操作过程中发生质粒断裂，不影响的，看第一条带的大小是否合适后拿特异性引物进行pcr验证
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
3楼2014-03-13 11:34:33
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wxl.1989822

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-03-14 09:24:58
逍遥e宝: 金币+1, ★有帮助, 我用了倒是不影响用途，不过发文章跑胶的时候四条带是不是很难看。。。 2014-03-14 09:41:20
应该没有大问题 如果不放心的话 如楼上所说可以把提取的质粒在转化下
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5楼2014-03-13 16:22:58
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xiquan1118

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2014-03-13 11:29:25
有时候会出现多于3条带的，不一定是混了别的质粒。

为什么质粒琼脂糖凝胶的时候可能会出现4条带？
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我走的很慢，但我从不后退
6楼2014-03-25 17:16:39
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
4条带没啥问题    我一样做的克隆
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7楼2014-03-25 17:42:38
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yuanyuanlg01

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
逍遥e宝: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 套在一起的。。这是什么情况 2014-03-26 09:41:57
有三四条带应该正常现象，楼主最好把图贴出来，大家才能更好的发现问题说明问题。如果你就是单纯的四条带一次分布的话，很可能是质粒的形态状态不同引起的。据说有一条带还不太清楚什么情况，其中一条是正常状态的质粒，一条是超螺旋，还有一条是套在一起的。你可以上网查一下相关的图有标注的。希望有帮助，有问题多多交流。
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8楼2014-03-25 20:35:20
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yuanyuanlg01

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yuanyuanlg01 at 2014-03-25 20:35:20
有三四条带应该正常现象，楼主最好把图贴出来，大家才能更好的发现问题说明问题。如果你就是单纯的四条带一次分布的话，很可能是质粒的形态状态不同引起的。据说有一条带还不太清楚什么情况，其中一条是正常状态的质 ...

就是两个环状质粒扣在一起了
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9楼2014-03-27 09:54:52
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c_jade

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

《分子克隆》上有描述，出现四条带，有一条淡淡的带是在超螺旋前面，忘了是什么原因造成的了。
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10楼2014-03-27 11:06:52
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