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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达蛋白时不加诱导剂也有目的蛋白表达，怎么回事？
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菡渡

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核表达蛋白时不加诱导剂也有目的蛋白表达，怎么回事？ 已有2人参与

求助，半小白一枚，最近我在做原核表达蛋白时，BL21中诱导，加诱导剂和不加诱导剂都有目的蛋白表达，这是怎么回事，求大神赐教！！
下图从左到右分别是Marker，目的蛋白1 诱导，目的蛋白1 未诱导，目的蛋白2 诱导，目的蛋白2未诱导，空载体未诱导，空载体诱导。（都是未破碎的，实际上破碎后发现在沉淀，形成包涵体了，伤心。。。。。）。未诱导的也出现很浓的目的蛋白。
图上看空载体处出现了目的蛋白2类似大小的条带，是否不能证明 诱导出来的蛋白不是我的目的蛋白啊？ 那怎么才能说明是我的呢？？？
    急求，感谢！！

原核表达蛋白时不加诱导剂也有目的蛋白表达，怎么回事？
15-4-17 16度 P1P2 24b.jpg
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1楼 2015-04-29 10:47:15
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人车

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

您好 我现在也在做基因表达 你用的是质粒呢 会不会是质粒的表达调控不严谨 还有就是你蛋白的分子量大约是多少呢 你有marker 可以比较一下
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2楼2015-05-06 17:07:37
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caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
菡渡(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-06 19:27:16
你用的培养基是什么？IPTG（乳糖类似物）不易分解，替代乳糖启动乳糖操纵子，表达蛋白。如果说你的培养基里本来就有乳糖，那加与不加IPTG关系就不大了。仅作为参考。
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3楼2015-05-06 17:47:57
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