24小时热门版块排行榜    

查看: 4853  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

菡渡

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核表达蛋白时不加诱导剂也有目的蛋白表达,怎么回事? 已有2人参与

求助,半小白一枚,最近我在做原核表达蛋白时,BL21中诱导,加诱导剂和不加诱导剂都有目的蛋白表达,这是怎么回事,求大神赐教!!
下图从左到右分别是Marker,目的蛋白1 诱导,目的蛋白1 未诱导,目的蛋白2 诱导,目的蛋白2未诱导,空载体未诱导,空载体诱导。(都是未破碎的,实际上破碎后发现在沉淀,形成包涵体了,伤心。。。。。)。未诱导的也出现很浓的目的蛋白。
图上看空载体处出现了目的蛋白2类似大小的条带,是否不能证明 诱导出来的蛋白不是我的目的蛋白啊? 那怎么才能说明是我的呢???
    急求,感谢!!

原核表达蛋白时不加诱导剂也有目的蛋白表达,怎么回事?
15-4-17 16度 P1P2 24b.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


菡渡(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-06 19:27:16
你用的培养基是什么?IPTG(乳糖类似物)不易分解,替代乳糖启动乳糖操纵子,表达蛋白。如果说你的培养基里本来就有乳糖,那加与不加IPTG关系就不大了。仅作为参考。
3楼2015-05-06 17:47:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

人车

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

您好 我现在也在做基因表达 你用的是质粒呢 会不会是质粒的表达调控不严谨 还有就是你蛋白的分子量大约是多少呢 你有marker 可以比较一下
2楼2015-05-06 17:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +7 RichLi_ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 21:35 by Aoyijiang
[考研] 289求调剂 +12 硕星赴 2026-03-23 12/600 2026-03-25 18:41 by Ainin_
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +6 @taotao 2026-03-19 6/300 2026-03-25 08:37 by 木托莫露露
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 求调剂 +6 研研,接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 求调剂材料学硕080500,总分289分 5+3 @taotao 2026-03-19 21/1050 2026-03-23 10:17 by 冠c哥
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见