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speedking

木虫 (正式写手)

[求助] 求助大神帮忙分析PCR失败的原因!!已有2人参与

附件里是我的pcr产物的琼脂糖凝胶电泳图,两边的是marker条带,请各位帮忙分析一下原因!!

求助大神帮忙分析PCR失败的原因!!
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人生总会累的,现在不累,以后会更累!
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个是没有扩增成功啊,下面那一条带应该是引物二聚体了,具体的原因有很多,比如模板是否正确,引物设计是否合理,退火温度等,我之前发过一个关于质粒重组的帖子,里面分析了很多相关过程的常见问题及解决方法,您可以看一下,肯定会有帮助的。http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=8629917
医学&统计学
2楼2015-04-23 16:03:32
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甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
speedking: 金币+10, 有帮助 2015-08-10 14:06:25
你marker都有问题,首先肯定和电泳液和胶板有问题,换新的电泳液或者重新制备新的胶板再试试,再者就是你跑的时间太短了吧,好像marker都没有跑开呢,不过尽管如此,还是可以看到你好像没有目的条带,只是一些引物二聚体,所以你还需要重新确定退火温度或者重新设计引物了。总之,这是一次非常失败的电泳,原谅我说的比较直白,呵呵。希望对你有帮助,祝好!
我要让你的生活因为有我而更精彩
3楼2015-04-23 17:20:00
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