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新虫 (初入文坛)

[交流] 不知道为什么蛋白电泳条带总是最前面的小分子量出现弥散,大分子量的条带却很清楚?? 已有2人参与

求解决??!!

不知道为什么蛋白电泳条带总是最前面的小分子量出现弥散,大分子量的条带却很清楚??
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不知道为什么蛋白电泳条带总是最前面的小分子量出现弥散,大分子量的条带却很清楚??-1
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不知道为什么蛋白电泳条带总是最前面的小分子量出现弥散,大分子量的条带却很清楚??-2
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种问题很常见,通常SDS-PAGE胶的蛋白跑下来以后就是一个梯形,越靠下边越窄,且比较弥散,跑得时间越长这个现象就越严重,这主要是由于重组蛋白表达的样品自身弥散(受热时加快)所造成的,不过可以有办法减轻这种程度,跑胶的时候放冰浴,时间不要太长(目的蛋白跑到中间就行了),上样量大点儿,另外,你的目的蛋白是多少KD的,注意一下胶的浓度,如果太小了也容易使小分子蛋白弥散。
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
2楼2015-04-21 09:29:13
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nemo88

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼2015-04-22 09:06:02
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1287157052

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-04-21 09:29:13
这种问题很常见,通常SDS-PAGE胶的蛋白跑下来以后就是一个梯形,越靠下边越窄,且比较弥散,跑得时间越长这个现象就越严重,这主要是由于重组蛋白表达的样品自身弥散(受热时加快)所造成的,不过可以有办法减轻这种 ...

不知道是不是凝胶预混液的问题,从分子量30kd往下就感觉开始出现弥散了?
4楼2015-04-25 21:46:30
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