应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母GS115摇瓶发酵
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 2108  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

id90

铜虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母GS115摇瓶发酵 已有2人参与

根据毕赤酵母表达手册，我一般都是YPD活化，之后按1%接种到25ml的BMGY培养基，培养16-18h（OD=4-6），之后离心收集菌体，加入到100ml的BMMY培养基至终OD=1，每天加甲醇诱导。
但是最近看文献有的是 25ml BMGY培养后 用5ml 的BMMY重悬 之后继续培养。哪种方法正确？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-04-01 19:29:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uranuser

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助！ 2015-04-07 11:07:12
这应该是同一种方法吧，你在BMGY中培养结束后离心后收集菌体再加入到BMMY中，这一步就是用少量BMMY重悬后，再增大BMMY体积进行诱导培养吧。
简单说就是都正确。事实上，有文献预计BMGY中的甘油耗尽后不离心，直接加入BMMY进行诱导，我们验证过此种方法表达量没有区别。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-04-02 09:43:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsb0306

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
得看你要表达的东西多少，好不好表达，两个方法一样，只不过诱导时一个浓缩了一个稀释了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
虫子
3楼2015-04-02 14:58:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

id90

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wsb0306 at 2015-04-02 14:58:06
得看你要表达的东西多少，好不好表达，两个方法一样，只不过诱导时一个浓缩了一个稀释了

这两种方法诱导时，菌浓度不一样。第一种菌浓OD值约为1、第二种菌浓度大于4.我构建的毕赤酵母是甲醇缓慢利用型。表达蛋白不应该在对数生长期吗？
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-02 15:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsb0306

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by id90 at 2015-04-02 15:11:44
这两种方法诱导时，菌浓度不一样。第一种菌浓OD值约为1、第二种菌浓度大于4.我构建的毕赤酵母是甲醇缓慢利用型。表达蛋白不应该在对数生长期吗？...

不一定在指数期诱导，看你的蛋白情况而定

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
虫子
5楼2015-04-03 15:47:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ggyy0911

铁虫 (正式写手)
能不能问下，你活化的菌是平板上的单菌落还是保存的菌种？然后怎么确定在对数生长期呢？我个人觉得第一种方法好，因为我挑过单克隆直接放BMGY，通常要24h才能到OD值4，时间太长就错过对数期了吧。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2015-06-07 15:18:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

么么哒0120

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by uranuser at 2015-04-02 09:43:22
这应该是同一种方法吧，你在BMGY中培养结束后离心后收集菌体再加入到BMMY中，这一步就是用少量BMMY重悬后，再增大BMMY体积进行诱导培养吧。
简单说就是都正确。事实上，有文献预计BMGY中的甘油耗尽后不离心，直接加 ...

你好，摇瓶发酵如何确定甘油已经消耗完？需不需要饥饿处理一段时间再加甲醇？
赞一下 回复此楼
7楼2016-09-23 15:35:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 id90 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 5/250 2026-03-28 21:26 by zhq0425
[考研] 275求调剂 +10 Micky11223 2026-03-25 14/700 2026-03-28 15:48 by Micky11223
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +3 nhj_ 2026-03-25 3/150 2026-03-28 13:24 by Iveryant
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考博] 26申博 +3 加油冲啊！ 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 307求调剂 +8 超级伊昂大王 2026-03-24 9/450 2026-03-27 15:34 by 超级伊昂大王
[考研] 322求调剂 +4 我真的很想学习 2026-03-23 4/200 2026-03-27 13:51 by 杨杨杨紫
[考研] 考研调剂 +10 呼呼？~+123456 2026-03-24 10/500 2026-03-27 11:46 by wangjy2002
[考研] 0703化学338求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭