24小时热门版块排行榜    

查看: 5470  |  回复: 13

id90

铜虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母GS115甲醇诱导发酵液颜色? 已有3人参与

最近做毕赤酵母GS115发酵,胞外表达目的蛋白。在换BMMY培养基时,已经加入了抗生素,甲醇诱导后,通常发酵液为黄色,但是有时候会出现发酵液变绿的现象。基本上十个会出现一两个,有时候隔一天出现一个。这种现象是正常的,还是染菌了? 辛苦发酵不容易,不舍得扔掉  求解答,谢谢!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

烟雨莫问

金虫 (小有名气)

毕赤酵母发酵过程中产生的色素主要是绿色的,只要用甲醇启动子的都会产生,它是醇氧化酶(Aox1p).引起的,该酶在高密度发酵过程中会形成同源八聚体与FAD结合,形成发色基团。只有甲醇诱导后才会产生,诱导之前不会出现,它并不是分泌酶,是到了发酵后期,随着细胞的裂解释放到培养基中的,所以培养基颜色很绿。通过这个也可以大体判定诱导的程度。
11楼2014-12-21 19:57:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
id90: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2014-10-24 00:33:48
变绿色我也是有碰到过的,主要还是发酵添加的微量元素盐PTM1/4里的亚铁离子,而且你也说了静置后会变为深黄色,这都属于正常情况;毕赤酵母进入诱导阶段,染菌的可能性是比较小的,可以大胆做,当然在有怀疑的时候还应该做做镜检(但这个主要是在BMGY阶段做)。
我有次做500L罐时,甲醇加多了直接加自来水照样发酵做,过滤除菌都没有,直接桶接了从入料口倒进去,也不会染菌。
做实验不要怕,了不起就是重复,听你的描述应该还在摇瓶阶段,大胆做。另外甲醇诱导阶段应该没有加抗生素的必要了。
至于你说的出现绿色时间不同,这个我猜测性的说下,每个摇瓶毕竟不同,且毕赤酵母发酵时产酸的,那菌的生长状态和时期不同,发酵液的pH值也都是不同的,那么呈现颜色时间有差别也比较正常。
7楼2014-10-21 23:27:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

id90

铜虫 (初入文坛)

补充一下,绿色的发酵液,我静置一段时间后,发酵液绿色变淡了,呈深黄色了!
2楼2014-10-17 23:26:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

树2979

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以做镜检看看是否有杂菌

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-10-17 23:55:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

id90

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 树2979 at 2014-10-17 23:55:00
可以做镜检看看是否有杂菌

恩 谢谢回复 这个我准备做 您做过毕赤酵母发酵吗 我希望和做过毕赤酵母发酵的 比对一下 找出问题出在哪
4楼2014-10-18 00:22:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by id90 at 2014-10-18 00:22:26
恩 谢谢回复 这个我准备做 您做过毕赤酵母发酵吗 我希望和做过毕赤酵母发酵的 比对一下 找出问题出在哪...

毕赤酵母正常发酵,应该是乳白色,染菌会呈褐色,但没见过你的绿色
5楼2014-10-18 22:50:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

id90

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jjwhl at 2014-10-18 22:50:19
毕赤酵母正常发酵,应该是乳白色,染菌会呈褐色,但没见过你的绿色...

在摇床震荡中颜色偏绿,从摇床拿出来静置一会,就成深黄色了。

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-10-19 11:37:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拂晓晨风

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

毕赤酵母诱导时间长了,颜色变绿或者黄绿色很正常。在发酵罐上更明显。
8楼2014-10-22 21:37:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

id90

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by reallpf at 2014-10-21 23:27:11
变绿色我也是有碰到过的,主要还是发酵添加的微量元素盐PTM1/4里的亚铁离子,而且你也说了静置后会变为深黄色,这都属于正常情况;毕赤酵母进入诱导阶段,染菌的可能性是比较小的,可以大胆做,当然在有怀疑的时候还 ...

最近才看见回复,真的是太感谢了!我最近才开始做实验,总是怕做错,没出结果也很着急,看了你的回复,我对自己也有些信心了! 谢谢!!!
9楼2014-10-24 00:26:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

id90

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 拂晓晨风 at 2014-10-22 21:37:55
毕赤酵母诱导时间长了,颜色变绿或者黄绿色很正常。在发酵罐上更明显。

谢谢回复,发酵呈绿色也是正常现象,感谢解答了我的疑惑。
10楼2014-10-24 00:33:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 id90 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 u1xkze8ybe 2026-07-30 7/350 2026-07-31 12:10 by syhhffkrym
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 u1xkze8ybe 2026-07-30 3/150 2026-07-31 12:08 by syhhffkrym
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 u1xkze8ybe 2026-07-30 6/300 2026-07-31 12:05 by syhhffkrym
[教师之家] 基础研究怎么拉横向,学校到款任务越来越多,难以完成 拉横向,都有哪些途径啊 +6 锦衣卫寒战 2026-07-28 6/300 2026-07-31 11:27 by syl200707
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液,是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 小木虫看见有人已经知道结果了 +15 1234567wang 2026-07-25 19/950 2026-07-31 08:30 by ZJTJZ
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +8 布布和一二 2026-07-30 8/400 2026-07-31 01:51 by alongwaytogo
[基金申请] 系统今天又提示维护了,估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +14 wangze12014 2026-07-28 17/850 2026-07-30 20:10 by kissu88
[考博] 申请2027年材料/化学类博士 10+3 考研老狗? 2026-07-25 5/250 2026-07-30 19:33 by 白色木鱼
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
[基金申请] 今年的WR进展到哪一步了? +5 wsgjhwz 2026-07-25 9/450 2026-07-30 12:59 by 可淡不可忘
[有机交流] 产物和副产物价值比较 30+4 小汤02 2026-07-27 5/250 2026-07-30 12:44 by czyzsu
[基金申请] 时间戳他又来了 +14 晓晓爱翠翠 2026-07-26 17/850 2026-07-29 16:30 by 呵呵二哥
[有机交流] 这个自发加氧反应的机理是什么? 50+4 YUAN2273 2026-07-25 7/350 2026-07-29 12:27 by xiaobenpu
[基金申请] 没消息就是被刷了呗 +13 lambert2014 2026-07-24 14/700 2026-07-29 10:38 by msh145800
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 11/550 2026-07-29 05:50 by drbart
[基金申请] 同事接到电话了,我却没有 +4 1234567wang 2026-07-27 4/200 2026-07-28 10:11 by GOODLUCKER
[基金申请] 准备明年的基金了 +5 Tide man 2026-07-27 5/250 2026-07-28 09:25 by newfuzzy1
[分析] 水蒸气蒸馏法乳化现象 +3 月光娇娇 2026-07-26 3/150 2026-07-26 23:25 by caiyun
信息提示
请填处理意见