24小时热门版块排行榜    

查看: 2607  |  回复: 8

自在小雨

金虫 (初入文坛)

[求助] 请教关于毕赤酵母摇瓶发酵的问题 已有2人参与

我现在在做毕赤酵母表达外源基因的摇瓶发酵实验,每隔24小时取样,测OD值,到第96个小时时,都还正常,可是到120h时,原本应该下降的OD突然增加了,而且增加的幅度达到10左右,未染菌,就大神给个解释!!!谢谢啦~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

实验虐我千百遍,我待实验如初恋
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+10, Thanks! 2014-04-16 08:51:17
自在小雨(laozuzunzhe代发): 金币+10, 感谢应助! 2014-04-16 08:51:58
laozuzunzhe: 金币-6, 前面忘了点代发金币,扣6了发给你4个金币哈! 2014-04-16 08:52:56
需要知道你的生长曲线,大概的OD值变化情况、培养基、表达的蛋白和表达方式。能附上大概的发酵过程最好。

按这个情况,我大胆估计一下,仅为讨论,供你参考:
个人初步认为是诱导型胞内表达,使用的基础盐培养基,碳源简单不易利用,发酵前96h菌体生长速度缓慢(15以下)。如果你的情况和我推断的大致相同,则是比较正常的。碳源不易利用,细胞生长缓慢,产生的外源蛋白较少,碳源消耗更慢;菌体逐渐适应利用此碳源,菌体生产代谢加快,OD值迅速增加。在此情况,诱导96h后蛋白表达产量也会迅速增加。我之前做过一个外源蛋白的表达,产量情况与此类似。

组成型表达盒诱导型胞外表达出现这种情况的可能性较小。总的来说,还是需要你的更加具体的实验情况,才好分析。
2楼2014-04-14 22:43:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by reallpf at 2014-04-14 22:43:42
需要知道你的生长曲线,大概的OD值变化情况、培养基、表达的蛋白和表达方式。能附上大概的发酵过程最好。

按这个情况,我大胆估计一下,仅为讨论,供你参考:
个人初步认为是诱导型胞内表达,使用的基础盐培养基 ...

抱歉,最后一句有个错别字。
组成型表达(“和”)诱导型胞外表达....
3楼2014-04-14 22:44:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

自在小雨

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by reallpf at 2014-04-14 22:43:42
需要知道你的生长曲线,大概的OD值变化情况、培养基、表达的蛋白和表达方式。能附上大概的发酵过程最好。

按这个情况,我大胆估计一下,仅为讨论,供你参考:
个人初步认为是诱导型胞内表达,使用的基础盐培养基 ...

是诱导型胞外表达,96h时OD值达到了40左右,但是120h飙升至50~~太不正常了啊
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
4楼2014-04-15 11:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
自在小雨(laozuzunzhe代发): 金币+2, 感谢应助! 2014-04-16 08:50:44
考虑可能原因:
1、蒸发太大
2、菌体OD增加整体上应该是加快的(单位体积菌体重量随时间增多,甲醇利用能力增强,生长加快)
5楼2014-04-15 11:29:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

自在小雨

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wt3532 at 2014-04-15 11:29:44
考虑可能原因:
1、蒸发太大
2、菌体OD增加整体上应该是加快的(单位体积菌体重量随时间增多,甲醇利用能力增强,生长加快)

觉得1的可能性较大,因为每天要取样,感觉培养基的量越来越少了~~谢谢啊!
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
6楼2014-04-15 18:26:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

自在小雨

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wt3532 at 2014-04-15 11:29:44
考虑可能原因:
1、蒸发太大
2、菌体OD增加整体上应该是加快的(单位体积菌体重量随时间增多,甲醇利用能力增强,生长加快)

不知道怎么给您金币,求教方法,好把金币给您呀
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
7楼2014-04-16 16:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fjch2005

金虫 (小有名气)

摇瓶培养的酵母,蒸发量有多大啊?
8楼2014-05-20 14:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学不明白

新虫 (初入文坛)

为什么要每天测OD?呢
9楼2015-01-19 09:28:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 自在小雨 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +4 爱看书的可乐 2026-08-08 5/250 2026-08-08 19:06 by 超级海虾
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 15:59 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +5 哈哈114477 2026-08-01 5/250 2026-08-08 15:14 by 仁砚薪传
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 WQyTGMbfH7Cx 2026-08-07 4/200 2026-08-08 15:02 by oEVWOejN9taj
[基金申请] fileCode有新解读? +9 Tide man 2026-08-08 17/850 2026-08-08 14:56 by archvillain
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:42 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见