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请教关于毕赤酵母摇瓶发酵的问题已有2人参与
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| 我现在在做毕赤酵母表达外源基因的摇瓶发酵实验,每隔24小时取样,测OD值,到第96个小时时,都还正常,可是到120h时,原本应该下降的OD突然增加了,而且增加的幅度达到10左右,未染菌,就大神给个解释!!!谢谢啦~~ |
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reallpf
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+10, Thanks! 2014-04-16 08:51:17
自在小雨(laozuzunzhe代发): 金币+10, 感谢应助! 2014-04-16 08:51:58
laozuzunzhe: 金币-6, 前面忘了点代发金币,扣6了发给你4个金币哈! 2014-04-16 08:52:56
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需要知道你的生长曲线,大概的OD值变化情况、培养基、表达的蛋白和表达方式。能附上大概的发酵过程最好。 按这个情况,我大胆估计一下,仅为讨论,供你参考: 个人初步认为是诱导型胞内表达,使用的基础盐培养基,碳源简单不易利用,发酵前96h菌体生长速度缓慢(15以下)。如果你的情况和我推断的大致相同,则是比较正常的。碳源不易利用,细胞生长缓慢,产生的外源蛋白较少,碳源消耗更慢;菌体逐渐适应利用此碳源,菌体生产代谢加快,OD值迅速增加。在此情况,诱导96h后蛋白表达产量也会迅速增加。我之前做过一个外源蛋白的表达,产量情况与此类似。 组成型表达盒诱导型胞外表达出现这种情况的可能性较小。总的来说,还是需要你的更加具体的实验情况,才好分析。 |
2楼2014-04-14 22:43:42
reallpf
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