应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母GS115摇瓶发酵
51/1返回列表
查看: 2358  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

id90

铜虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母GS115摇瓶发酵 已有2人参与

根据毕赤酵母表达手册，我一般都是YPD活化，之后按1%接种到25ml的BMGY培养基，培养16-18h（OD=4-6），之后离心收集菌体，加入到100ml的BMMY培养基至终OD=1，每天加甲醇诱导。
但是最近看文献有的是 25ml BMGY培养后 用5ml 的BMMY重悬 之后继续培养。哪种方法正确？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-04-01 19:29:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

id90

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wsb0306 at 2015-04-02 14:58:06
得看你要表达的东西多少，好不好表达，两个方法一样，只不过诱导时一个浓缩了一个稀释了

这两种方法诱导时，菌浓度不一样。第一种菌浓OD值约为1、第二种菌浓度大于4.我构建的毕赤酵母是甲醇缓慢利用型。表达蛋白不应该在对数生长期吗？
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-02 15:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

uranuser

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助！ 2015-04-07 11:07:12
这应该是同一种方法吧，你在BMGY中培养结束后离心后收集菌体再加入到BMMY中，这一步就是用少量BMMY重悬后，再增大BMMY体积进行诱导培养吧。
简单说就是都正确。事实上，有文献预计BMGY中的甘油耗尽后不离心，直接加入BMMY进行诱导，我们验证过此种方法表达量没有区别。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-04-02 09:43:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsb0306

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
得看你要表达的东西多少，好不好表达，两个方法一样，只不过诱导时一个浓缩了一个稀释了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
虫子
3楼2015-04-02 14:58:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsb0306

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by id90 at 2015-04-02 15:11:44
这两种方法诱导时，菌浓度不一样。第一种菌浓OD值约为1、第二种菌浓度大于4.我构建的毕赤酵母是甲醇缓慢利用型。表达蛋白不应该在对数生长期吗？...

不一定在指数期诱导，看你的蛋白情况而定

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
虫子
5楼2015-04-03 15:47:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +3 wangze12014 2026-08-14 4/200 2026-08-15 18:05 by babangida
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 7/350 2026-08-15 17:58 by 7huP8NPKZCp9
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +11 archvillain 2026-08-15 20/1000 2026-08-15 17:47 by 医学老男孩
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 9/450 2026-08-15 17:46 by 7huP8NPKZCp9
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 6/300 2026-08-15 17:34 by 7huP8NPKZCp9
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 3/150 2026-08-15 14:53 by QXtWNz7PI7wZ
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 14:41 by QXtWNz7PI7wZ
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +7 majunge000 2026-08-11 9/450 2026-08-15 13:34 by kiz2011
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 HFw0lei2R37i 2026-08-14 9/450 2026-08-15 11:33 by KxMI1BYBxWX1
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 07:09 by 4wMiSEwB6436
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭