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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家做GS115毕赤酵母表达时流加甲醇是怎么灭菌的？
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foxcl

铁虫 (正式写手)

[交流] 大家做GS115毕赤酵母表达时流加甲醇是怎么灭菌的？

我们用50%的甲醇。以前是过0.22um的有机相膜。但是感觉太慢了。

亲们，你们是用什么方式灭菌的？还是直接加往BMGY和BMMY中加纯甲醇（不灭菌）的？
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1楼 2012-12-04 23:51:17
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回帖置顶 ( 共有1个 )

amaoni

木虫 (小有名气)
foxcl: 回帖置顶 2012-12-05 21:55:00
都用，50%的要用无菌水稀释
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4楼2012-12-05 19:50:44
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amaoni

木虫 (小有名气)
★
foxcl(金币+1): 谢谢参与
灭菌的话只能过滤除菌，但是甲醇不灭菌也可以。
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2楼2012-12-05 08:32:51
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yxdhd

铜虫 (小有名气)
★
foxcl(金币+1): 谢谢参与
我们在超净台里面打开一瓶新的，不需要灭菌
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6楼2012-12-05 23:07:51
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ltb321

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
实验室加纯甲醇，工业生产用液体膜过滤
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13楼2013-03-04 16:31:12
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jimjohntall

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用新开封甲醇，不用灭菌的
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14楼2015-04-06 21:24:36
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林家女孩

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用新的甲醇，在超净台放着，专用，不灭菌。是加纯的甲醇，终浓度是要的就可以了
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15楼2015-04-07 16:41:43
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普通回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by amaoni at 2012-12-05 08:32:51
灭菌的话只能过滤除菌，但是甲醇不灭菌也可以。

你们是加纯的甲醇，还是50%的甲醇？或者其它的浓度的甲醇
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3楼2012-12-05 09:38:54
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foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by amaoni at 2012-12-05 19:50:44
都用，50%的要用无菌水稀释

好滴呀，谢谢了
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5楼2012-12-05 21:54:39
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
配制50%的时用无菌不灭菌，无水甲纯或者95%以上的不用灭菌，发酵罐上流加的话无菌要求会理低一些，原因是开始流加甲醇的时候菌密度已经比较高了，此时的pH值一般比较低，不易染杂菌。
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7楼2012-12-06 09:09:20
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awvc

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
过滤除菌  直接加纯的
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8楼2012-12-07 14:17:54
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foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by awvc at 2012-12-07 14:17:54
过滤除菌  直接加纯的

直接加纯的有点狠啊。
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9楼2012-12-07 19:08:48
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wqx1214

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们也是取一瓶新的，在超净台里直接加，用纯的，按比例加就行。
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10楼2012-12-19 21:44:54
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liujianmin68

木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我在实验中也是直接加纯甲醇，一般是1%吧。没有出现过污染的问题，另外，这些试剂建议买国药的，我一直相信国药的试剂，使用起来更放心。
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11楼2012-12-19 22:31:10
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接加纯的，或者无菌水稀释，注意安全
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12楼2012-12-20 10:54:37
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jjwhl

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by liujianmin68 at 2012-12-19 22:31:10
我在实验中也是直接加纯甲醇，一般是1%吧。没有出现过污染的问题，另外，这些试剂建议买国药的，我一直相信国药的试剂，使用起来更放心。

楼主，你的1%是添加量吗？还是终浓度？要是添加量的话，到第二天怎么确定添加的甲醇都利用了呢
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16楼2015-04-20 21:58:12
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luwei13566

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
按理说加多少浓度的都可以，但是纯甲醇太危险，我曾经看到有开着酒精灯加纯甲醇的，现在想想都后怕。

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17楼2015-04-21 02:18:01
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