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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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maytonmm

铜虫 (正式写手)

[求助] 毕赤酵母表达甲醇浓度 已有1人参与

请问谁可以告诉下，在毕赤酵母摇瓶表达时甲醇浓度怎么检测啊，是化学分光光度计法？第一次接触，都不太懂

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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jiayou !
1楼 2015-01-05 09:58:22
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
maytonmm: 金币+20 2015-01-05 15:18:22
条件允许，气相最好，再有就是生化分析仪，带醇氧化膜的那种
摇瓶发酵，我们一般很少去测它的甲醇浓度，根据快速利用型或慢速利用型的特点，定期往里加就行了，上罐发酵根据DO-start法就行，如果是慢速利用型的在上罐的时候就需要检测甲醇浓度了。ok。
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一品黄山
2楼2015-01-05 11:44:16
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maytonmm

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ls2046 at 2015-01-05 11:44:16
条件允许，气相最好，再有就是生化分析仪，带醇氧化膜的那种
摇瓶发酵，我们一般很少去测它的甲醇浓度，根据快速利用型或慢速利用型的特点，定期往里加就行了，上罐发酵根据DO-start法就行，如果是慢速利用型的在上 ...

我目前只做摇瓶发酵，是快速利用型，如果甲醇浓度为0.5%，那我每次100 mL培养加500 uL甲醇，是这样吗？不用考虑利用率？
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jiayou !
3楼2015-01-05 15:00:23
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by maytonmm at 2015-01-05 15:00:23
我目前只做摇瓶发酵，是快速利用型，如果甲醇浓度为0.5%，那我每次100 mL培养加500 uL甲醇，是这样吗？不用考虑利用率？...

一般情况下，按你的加法，每12h或24h加一次就行了。具体加1%还是0.5%，要看做的效果怎么样。
甲醇加进去之后，酵母利用加挥发，其实很快就没有了。摇瓶只是初步看看，具体研究表达量，还是在罐上得到的数据才有意义。且在罐上表达量一般会得到大幅度提升。
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一品黄山
4楼2015-01-05 15:05:36
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maytonmm

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ls2046 at 2015-01-05 15:05:36
一般情况下，按你的加法，每12h或24h加一次就行了。具体加1%还是0.5%，要看做的效果怎么样。
甲醇加进去之后，酵母利用加挥发，其实很快就没有了。摇瓶只是初步看看，具体研究表达量，还是在罐上得到的数据才有意 ...

好的，太谢谢你了。
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jiayou !
5楼2015-01-05 15:18:14
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sjg_yuhuashi

木虫 (初入文坛)
摇瓶上发酵的甲醇浓度就没必要检测了，上罐的需要检测下，但是积累了发酵经验的话，可以根据经验来添加了，简便的检测甲醇浓度的方法还有比较简单的变色酸法，不需要那么多仪器和复杂的步骤，相对也比较准确
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6楼2015-03-19 15:42:01
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jjwhl

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ls2046 at 2015-01-05 15:05:36
一般情况下，按你的加法，每12h或24h加一次就行了。具体加1%还是0.5%，要看做的效果怎么样。
甲醇加进去之后，酵母利用加挥发，其实很快就没有了。摇瓶只是初步看看，具体研究表达量，还是在罐上得到的数据才有意 ...

按照楼主的经验，上罐发酵一般比摇瓶发酵，会提高多少倍呢？是10-100倍吗？10倍多，还是100倍多呢
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7楼2015-04-20 22:06:33
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jjwhl at 2015-04-20 22:06:33
按照楼主的经验，上罐发酵一般比摇瓶发酵，会提高多少倍呢？是10-100倍吗？10倍多，还是100倍多呢...

从我做的两个酶（一个是植酸酶，一个是淀粉酶）看，一般是8-10倍。经验之外的，本人就不好多说了，呵呵
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一品黄山
8楼2015-04-21 08:39:25
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