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maytonmm

铜虫 (正式写手)

[求助] 毕赤酵母表达甲醇浓度 已有1人参与

请问谁可以告诉下,在毕赤酵母摇瓶表达时甲醇浓度怎么检测啊,是化学分光光度计法?第一次接触,都不太懂

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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jiayou !
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
maytonmm: 金币+20 2015-01-05 15:18:22
条件允许,气相最好,再有就是生化分析仪,带醇氧化膜的那种
摇瓶发酵,我们一般很少去测它的甲醇浓度,根据快速利用型或慢速利用型的特点,定期往里加就行了,上罐发酵根据DO-start法就行,如果是慢速利用型的在上罐的时候就需要检测甲醇浓度了。ok。
一品黄山
2楼2015-01-05 11:44:16
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maytonmm

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ls2046 at 2015-01-05 11:44:16
条件允许,气相最好,再有就是生化分析仪,带醇氧化膜的那种
摇瓶发酵,我们一般很少去测它的甲醇浓度,根据快速利用型或慢速利用型的特点,定期往里加就行了,上罐发酵根据DO-start法就行,如果是慢速利用型的在上 ...

我目前只做摇瓶发酵,是快速利用型,如果甲醇浓度为0.5%,那我每次100 mL培养加500 uL甲醇,是这样吗?不用考虑利用率?
jiayou !
3楼2015-01-05 15:00:23
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by maytonmm at 2015-01-05 15:00:23
我目前只做摇瓶发酵,是快速利用型,如果甲醇浓度为0.5%,那我每次100 mL培养加500 uL甲醇,是这样吗?不用考虑利用率?...

一般情况下,按你的加法,每12h或24h加一次就行了。具体加1%还是0.5%,要看做的效果怎么样。
甲醇加进去之后,酵母利用加挥发,其实很快就没有了。摇瓶只是初步看看,具体研究表达量,还是在罐上得到的数据才有意义。且在罐上表达量一般会得到大幅度提升。
一品黄山
4楼2015-01-05 15:05:36
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maytonmm

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ls2046 at 2015-01-05 15:05:36
一般情况下,按你的加法,每12h或24h加一次就行了。具体加1%还是0.5%,要看做的效果怎么样。
甲醇加进去之后,酵母利用加挥发,其实很快就没有了。摇瓶只是初步看看,具体研究表达量,还是在罐上得到的数据才有意 ...

好的,太谢谢你了。
jiayou !
5楼2015-01-05 15:18:14
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sjg_yuhuashi

木虫 (初入文坛)

摇瓶上发酵的甲醇浓度就没必要检测了,上罐的需要检测下,但是积累了发酵经验的话,可以根据经验来添加了,简便的检测甲醇浓度的方法还有比较简单的变色酸法,不需要那么多仪器和复杂的步骤,相对也比较准确
6楼2015-03-19 15:42:01
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jjwhl

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ls2046 at 2015-01-05 15:05:36
一般情况下,按你的加法,每12h或24h加一次就行了。具体加1%还是0.5%,要看做的效果怎么样。
甲醇加进去之后,酵母利用加挥发,其实很快就没有了。摇瓶只是初步看看,具体研究表达量,还是在罐上得到的数据才有意 ...

按照楼主的经验,上罐发酵一般比摇瓶发酵,会提高多少倍呢?是10-100倍吗?10倍多,还是100倍多呢
7楼2015-04-20 22:06:33
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by jjwhl at 2015-04-20 22:06:33
按照楼主的经验,上罐发酵一般比摇瓶发酵,会提高多少倍呢?是10-100倍吗?10倍多,还是100倍多呢...

从我做的两个酶(一个是植酸酶,一个是淀粉酶)看,一般是8-10倍。经验之外的,本人就不好多说了,呵呵
一品黄山
8楼2015-04-21 08:39:25
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