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sunyu65045

木虫 (初入文坛)

[求助] 重组表达质粒测序正确却不能表达蛋白 已有2人参与

有个问题想向大家请教,我使用双酶切的pQE30与六段经过同样双酶切的基因分别进行了连接,导入到大肠杆菌中,质粒酶切结果和测序结果均正确却只有两种蛋白表达了出来,请大家帮忙分析一下原因,多谢!!!
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SAM001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个原因太多啦。
可能是蛋白不好表达,也可能是形成包涵体变性,也可能是蛋白有毒性。建议你查查相关文献
2楼2015-03-28 22:12:02
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jey1235

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sunyu65045: 金币+10, 有帮助 2015-04-01 18:32:06
最近刚遇到这种情况,直接跑个诱导前和诱导后的细胞样,看看先表达不表达,如果对比前后看不到东西与其摸菌株,温度,诱导浓度,buffer条件测试原因,我觉得最根本的方法就是换载体。。。。。
3楼2015-03-28 22:27:05
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