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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] 毕赤酵母表达大量发酵无酶活 已有2人参与

各位虫友,最近再做毕赤酵母表达,用的是pGAPZ alpha A这个载体,测序阅读框正确,整合到基因组上以后提酵母DNA,用测序引物PCR验证已整合上去。空载做对照,10ml发酵能明显测出酶活,但是用100ml发酵就测不到酶活了,连续测2个周都没有,请问有人遇到类似的问题吗,解决不了好捉急啊!
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2015-03-09 12:40:46
老板要求的,我自己也不想做,凌晨一点是我这里下午4点钟。毕赤酵母很不好表达吗?...

,下午四点钟。。。。。
不知道对你有没有用,上传了一份文件。
不过你们老板是啥心态哦,无论用什么表达,只要表达出来不就行啦,哎搞不懂丫。
毕赤酵母我是不太理解,但是做熟练了之后应该也是不难的吧

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  • 附件 1 : 毕赤酵母表达操作手册(精译版).pdf
  • 2015-03-09 13:13:32, 837.36 K
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
10楼2015-03-09 13:16:49
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普通回帖

wt29088

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用大摇瓶、提高摇床转速看能不能解决问题。
2楼2015-03-05 14:48:55
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wt29088 at 2015-03-05 14:48:55
用大摇瓶、提高摇床转速看能不能解决问题。

用500的瓶子放100ml 培养基摇的,转速220,已经提不高了啊。
3楼2015-03-06 10:31:07
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
尝试用原核表达一下呢
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-03-06 13:27:38
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-06 13:27:38
尝试用原核表达一下呢

大肠表达过了,效果还不错
5楼2015-03-08 00:55:45
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

引用回帖:
5楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2015-03-08 00:55:45
大肠表达过了,效果还不错...

呵呵,没事早点 睡觉,身体健康最重要
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-03-08 20:39:41
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

内容已删除
7楼2015-03-09 00:46:14
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2015-03-09 00:46:14
大神给提点实验意见啊,ps早点睡这种事,我11点就睡了,有时差涅...

呵呵,既然原核表达成功了,为啥还为难自己去做毕赤酵母表达呢,看你是00:55回复的,所以让早点休息
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
8楼2015-03-09 10:31:00
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-09 10:31:00
呵呵,既然原核表达成功了,为啥还为难自己去做毕赤酵母表达呢,看你是00:55回复的,所以让早点休息...

老板要求的,我自己也不想做,凌晨一点是我这里下午4点钟。毕赤酵母很不好表达吗?
9楼2015-03-09 12:40:46
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