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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母表达大量发酵无酶活
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] 毕赤酵母表达大量发酵无酶活 已有2人参与

各位虫友，最近再做毕赤酵母表达，用的是pGAPZ alpha A这个载体，测序阅读框正确，整合到基因组上以后提酵母DNA，用测序引物PCR验证已整合上去。空载做对照，10ml发酵能明显测出酶活，但是用100ml发酵就测不到酶活了，连续测2个周都没有，请问有人遇到类似的问题吗，解决不了好捉急啊！
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1楼 2015-03-05 13:30:57
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
尝试用原核表达一下呢
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-03-06 13:27:38
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wt29088

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用大摇瓶、提高摇床转速看能不能解决问题。
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2楼2015-03-05 14:48:55
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wt29088 at 2015-03-05 14:48:55
用大摇瓶、提高摇床转速看能不能解决问题。

用500的瓶子放100ml 培养基摇的，转速220，已经提不高了啊。
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3楼2015-03-06 10:31:07
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-06 13:27:38
尝试用原核表达一下呢

大肠表达过了，效果还不错
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5楼2015-03-08 00:55:45
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