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浣花道人铁杆木虫 (正式写手)
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293细胞冻存和复苏
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| 新手,很着急!!!想请教给位一个问题,最近我一直在养293细胞,之前从别人那里要来一株冻存的293细胞,正常复苏(1000rpm离心,悬浮,培养)养的很好,等细胞长得差不多了的时候,我就冻存了,将培养基倒掉后,加胰酶消化30s,然后悬浮,离心,弃去培养基,用冻存液悬浮(90%小牛血清+10%DMSO),然后放在冻存盒里-80冻存,第二天液氮,然后我选了一只复苏,却发现细胞没有之前正常的293细胞的形态,都是大的圆形的贴壁细胞,长得都不正常,非常着急,已经好几次都是这样了,请给我帮我出出主意,到底是哪出的问题? |
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