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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】HEK293细胞冻存的注意事项？？？？？？
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akj8282

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】HEK293细胞冻存的注意事项？？？？？？

各位：

想请教大家个问题：HEK293细胞冻存的注意事项？   
                         例如：  细胞各冻存阶段的时间 （4℃时 需要多少时间，-20℃时需要多少时间，-80℃时需要多少时间）？？？
   
还有加入DMSO的量为多少最合适？？？？？？
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1楼 2010-12-17 14:09:07
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feng__

金虫 (著名写手)
4℃时 需要1h，-20℃时需要1h，-80℃过夜！
   
DMSO为10%
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2楼2010-12-17 16:30:33
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feng__

金虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2):鼓励发帖交流！ 2010-12-17 20:22:45
不过有人冻存的时候用的是相应的培养液+10%DMSO

有人用血清+10%DMSO   貌似都没什么问题，呵呵！

放心了，HEK293很好伺候的
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3楼2010-12-17 16:32:37
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
amisking(金币+2):鼓励发帖交流！ 2010-12-17 20:22:51
293贱养，完全培养基+10% DMSO足矣~用纯血清+DMSO太浪费了……
10% DMSO基本是通式了

其实，可以自己做个缓冻盒的……如果不想买的话
总之只要让冻存管周围是依靠异丙醇来导热的就可以，请充分发挥想象力

不嫌麻烦就按楼上分步冻了
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4楼2010-12-17 18:58:42
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记忆之舟

新虫 (小有名气)
10%的DMSO就可以
4℃半小时
-20℃半小时
-80℃过夜
接着放液氮就完事
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5楼2010-12-27 12:34:16
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)
直接-80过夜也行，然后液氮
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6楼2010-12-27 12:49:14
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