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akj8282

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】HEK293细胞冻存的注意事项??????

各位:

想请教大家个问题:HEK293细胞冻存的注意事项?   
                         例如:  细胞各冻存阶段的时间 (4℃时 需要多少时间,-20℃时需要多少时间,-80℃时需要多少时间)???
   
还有加入DMSO的量为多少最合适??????
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feng__

金虫 (著名写手)


4℃时 需要1h,-20℃时需要1h,-80℃过夜!
   
DMSO为10%
2楼2010-12-17 16:30:33
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feng__

金虫 (著名写手)


★ ★
amisking(金币+2):鼓励发帖交流! 2010-12-17 20:22:45
不过有人冻存的时候用的是相应的培养液+10%DMSO

有人用血清+10%DMSO   貌似都没什么问题,呵呵!

放心了,HEK293很好伺候的
3楼2010-12-17 16:32:37
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★ ★
amisking(金币+2):鼓励发帖交流! 2010-12-17 20:22:51
293贱养,完全培养基+10% DMSO足矣~用纯血清+DMSO太浪费了……
10% DMSO基本是通式了

其实,可以自己做个缓冻盒的……如果不想买的话
总之只要让冻存管周围是依靠异丙醇来导热的就可以,请充分发挥想象力

不嫌麻烦就按楼上分步冻了
4楼2010-12-17 18:58:42
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记忆之舟

新虫 (小有名气)


10%的DMSO就可以
4℃半小时
-20℃半小时
-80℃过夜
接着放液氮就完事
5楼2010-12-27 12:34:16
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)


直接-80过夜也行,然后液氮
6楼2010-12-27 12:49:14
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