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【求助/交流】HEK293细胞冻存的注意事项??????
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akj8282
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[交流]
【求助/交流】HEK293细胞冻存的注意事项??????
各位:
想请教大家个问题:HEK293细胞冻存的注意事项?
例如: 细胞各冻存阶段的时间 (4℃时 需要多少时间,-20℃时需要多少时间,-80℃时需要多少时间)???
还有加入DMSO的量为多少最合适??????
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2010-12-17 14:09:07
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amisking(金币+2):鼓励发帖交流! 2010-12-17 20:22:45
不过有人冻存的时候用的是相应的培养液+10%DMSO
有人用血清+10%DMSO 貌似都没什么问题,呵呵!
放心了,HEK293很好伺候的
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3楼
2010-12-17 16:32:37
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4℃时 需要1h,-20℃时需要1h,-80℃过夜!
DMSO为10%
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2楼
2010-12-17 16:30:33
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三磷酸腺苷
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amisking(金币+2):鼓励发帖交流! 2010-12-17 20:22:51
293贱养,完全培养基+10% DMSO足矣~用纯血清+DMSO太浪费了……
10% DMSO基本是通式了
其实,可以自己做个缓冻盒的……如果不想买的话
总之只要让冻存管周围是依靠异丙醇来导热的就可以,请充分发挥想象力
不嫌麻烦就按楼上分步冻了
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4楼
2010-12-17 18:58:42
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记忆之舟
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10%的DMSO就可以
4℃半小时
-20℃半小时
-80℃过夜
接着放液氮就完事
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5楼
2010-12-27 12:34:16
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