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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 离心收集的细胞能在-80度冻存吗？
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xiaoxiangyu1

新虫 (初入文坛)

[求助] 离心收集的细胞能在-80度冻存吗？ 已有6人参与

我养293T细胞的目的是用来提蛋白，但是暂时用不了太多。如果将多余的细胞离心后直接冻在-80度，以后还可以用吗？或是还需要什么其他条件？谢谢！
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1楼 2014-05-03 23:11:15
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+1, 感谢经验分享 2014-05-04 09:47:09
可以用。也可以液氮速冻，然后冻存-80.
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2楼2014-05-04 09:09:24
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不建议这么做，冻融有可能导致细胞破碎，蛋白酶释放后会降解蛋白。
直接提了蛋白冻在冰箱里更好。
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3楼2014-05-04 10:26:34
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xiaoxiangyu1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Rubisco580 at 2014-05-04 10:26:34
不建议这么做，冻融有可能导致细胞破碎，蛋白酶释放后会降解蛋白。
直接提了蛋白冻在冰箱里更好。

那我可以将细胞取出来直接加入裂解液和蛋白酶抑制剂吗？这样是不是可以避免蛋白酶释放后裂解蛋白的情况发生？
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4楼2014-05-09 21:59:52
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winterb

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以直接冻在-80度.冻融不可能导致细胞破碎.否则我们不需要破碎细胞.
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5楼2014-05-10 22:50:20
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foxcl

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果培养的有点多了，为了提蛋白的话，还是建议先提取蛋白再冷冻。

菌体如果不加保护剂直接冷冻，菌体必然破解死亡，长时间还是怕酶对你的蛋白有影响。

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6楼2014-05-10 22:57:56
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我做细胞的时候，是把细胞放到冻存液里，然后-20度冷却，再放到-80度冰箱，如果要保存半年以上，那就应该先-20度，再-80度，然后放进液氮

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7楼2014-05-10 22:58:57
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大脸猫2013

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以！我们实验室细胞都是直接当-80，

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8楼2014-05-10 23:00:10
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