应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 复苏培养杂交瘤细胞失败！！！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 1552  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

why0393

金虫 (正式写手)

[求助] 复苏培养杂交瘤细胞失败！！！

有没有做单抗的虫子？本实验室年前保存在液氮的的杂交瘤细胞现在怎么复苏都无法存活超过两天！细胞在瓶子里就是不长，而是慢慢的萎缩死亡。这是怎么回事？
PS：在保存的时候才发现保存用的血清是污染的血清。对复苏后的细胞离心清洗两次，外加双抗仍然无法存活。求高手指点
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
12345
1楼 2012-12-05 10:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yongliqin

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
why0393: 金币+10 2012-12-06 17:04:07
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与，欢迎常来 2012-12-07 08:06:25
你可以尝试一下在96孔板中复苏一下，待细胞长起来后在转回到瓶中，可能你本身活的细胞就不是很多，直接在瓶中复苏的话不容易活。
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-06 10:39:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love2412

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
why0393: 金币+10 2012-12-06 17:06:08
wizardfan: 金币+1, 谢谢分享经验 2012-12-07 08:06:42
刚复苏时的活性、密度是多少？要保证活细胞的密度。活性实在太低的话试下梯度离心分离活细胞，或者像2L说的那样用微孔板（还可以加滋养细胞）。至于污染问题，复苏初期影响不大的。
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-06 11:30:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

why0393

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yongliqin at 2012-12-06 10:39:25
你可以尝试一下在96孔板中复苏一下，待细胞长起来后在转回到瓶中，可能你本身活的细胞就不是很多，直接在瓶中复苏的话不容易活。

嗯，正有此意！多谢多谢！
赞一下 回复此楼
12345
4楼2012-12-06 17:03:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

why0393

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by love2412 at 2012-12-06 11:30:01
刚复苏时的活性、密度是多少？要保证活细胞的密度。活性实在太低的话试下梯度离心分离活细胞，或者像2L说的那样用微孔板（还可以加滋养细胞）。至于污染问题，复苏初期影响不大的。

嗯，我担心细胞太脆弱，所以只是在复苏之后用培养液洗两遍，低速离心。其实刚开始里面有活的细胞，只不过在过了一天之后细胞全萎缩了
赞一下 回复此楼
12345
5楼2012-12-06 17:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华俊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
why0393: 金币+10 2012-12-06 20:58:12
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-12-07 08:06:57
杂交瘤细胞复苏本来就是没有细胞系后复苏，也做杂交瘤细胞，并且遇到同样的问题，但是经过一段时间的摸索后来将细胞也全部复苏存活。
这个很大程度上是细胞冻存的问题，冻存液、冻存温度等等，很多实验室喜欢将细胞直接放在-80度冰箱中，这个保存时间很有限，一般三个月复苏都存在问题，放在液氮中就好多了，
复苏是注意几个问题：细胞密度，太稀少的话很难活下来，培养中发现，细胞密度越大细胞分裂越快，有文献报道，可能会依赖自身分泌的某些物质生长；合理把握换液时间；最好采用24孔板复苏，注意培养基配方，需要优化配方等等。祝好
赞一下 回复此楼
多一份快乐少一分烦恼！
6楼2012-12-06 19:18:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

why0393

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 华俊 at 2012-12-06 19:18:41
杂交瘤细胞复苏本来就是没有细胞系后复苏，也做杂交瘤细胞，并且遇到同样的问题，但是经过一段时间的摸索后来将细胞也全部复苏存活。
这个很大程度上是细胞冻存的问题，冻存液、冻存温度等等，很多实验室喜欢将细胞 ...

嗯，多谢多谢啊，接下来我会尝试一下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
12345
7楼2012-12-06 20:57:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 草包的快乐时光 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +9 元元青青 2026-03-31 12/600 2026-04-05 21:03 by 学员8dgXkO
[考研] 材料专硕283求调剂 +14 试试看呗 2026-04-04 15/750 2026-04-05 19:21 by jkddd
[考研] 调剂 +3 李广火 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:57 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂生寻找导师 +3 顾瞻考研啊 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:18 by 啵啵啵0119
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
[考研] 0703调剂 +11 拾玖壹 2026-04-04 12/600 2026-04-05 10:29 by 果冻大王
[考研] 材料调剂 +7 dxy调剂 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:15 by 陌秋26
[考研] 材料与化工363求推荐 +7 zh096 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:11 by 陌秋26
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +9 王一一依依 2026-03-30 12/600 2026-04-04 20:55 by dongzh2009
[考研] 0835学硕299求调剂 08大类可接受 +5 useryy 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:07 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +11 lyz0427 2026-04-03 11/550 2026-04-04 15:31 by dongzh2009
[考研] 复试调剂 +6 范根培 2026-04-04 6/300 2026-04-04 14:27 by 土木硕士招生
[考研] 0710生物学336分求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-04 10:10 by kiyy
[考研] 303求调剂 +10 DLkz1314. 2026-03-30 10/500 2026-04-03 18:03 by Jimmyandyou
[考研] 320求调剂 +5 振—TZ 2026-04-02 5/250 2026-04-03 14:42 by fxue1114
[考研] 求材料调剂 一志愿南昌大学 328分 +5 yyy..... 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:46 by 百灵童888
[考研] 282求调剂 +13 呼吸都是减肥 2026-04-01 13/650 2026-04-02 14:10 by baoball
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭