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why0393金虫 (正式写手)
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[求助]
复苏培养杂交瘤细胞失败！！！
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有没有做单抗的虫子？本实验室年前保存在液氮的的杂交瘤细胞现在怎么复苏都无法存活超过两天！细胞在瓶子里就是不长，而是慢慢的萎缩死亡。这是怎么回事？ PS：在保存的时候才发现保存用的血清是污染的血清。对复苏后的细胞离心清洗两次，外加双抗仍然无法存活。求高手指点 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
why0393: 金币+10 2012-12-06 20:58:12
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-12-07 08:06:57
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杂交瘤细胞复苏本来就是没有细胞系后复苏，也做杂交瘤细胞，并且遇到同样的问题，但是经过一段时间的摸索后来将细胞也全部复苏存活。 这个很大程度上是细胞冻存的问题，冻存液、冻存温度等等，很多实验室喜欢将细胞直接放在-80度冰箱中，这个保存时间很有限，一般三个月复苏都存在问题，放在液氮中就好多了， 复苏是注意几个问题：细胞密度，太稀少的话很难活下来，培养中发现，细胞密度越大细胞分裂越快，有文献报道，可能会依赖自身分泌的某些物质生长；合理把握换液时间；最好采用24孔板复苏，注意培养基配方，需要优化配方等等。祝好 |
6楼2012-12-06 19:18:41
2楼2012-12-06 10:39:25
3楼2012-12-06 11:30:01
why0393
金虫 (正式写手)
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4楼2012-12-06 17:03:59
20