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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 复苏培养杂交瘤细胞失败！！！
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why0393

金虫 (正式写手)

[求助] 复苏培养杂交瘤细胞失败！！！

有没有做单抗的虫子？本实验室年前保存在液氮的的杂交瘤细胞现在怎么复苏都无法存活超过两天！细胞在瓶子里就是不长，而是慢慢的萎缩死亡。这是怎么回事？
PS：在保存的时候才发现保存用的血清是污染的血清。对复苏后的细胞离心清洗两次，外加双抗仍然无法存活。求高手指点
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12345
1楼 2012-12-05 10:11:35
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why0393

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by love2412 at 2012-12-06 11:30:01
刚复苏时的活性、密度是多少？要保证活细胞的密度。活性实在太低的话试下梯度离心分离活细胞，或者像2L说的那样用微孔板（还可以加滋养细胞）。至于污染问题，复苏初期影响不大的。

嗯，我担心细胞太脆弱，所以只是在复苏之后用培养液洗两遍，低速离心。其实刚开始里面有活的细胞，只不过在过了一天之后细胞全萎缩了
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12345
5楼2012-12-06 17:06:03
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yongliqin

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
why0393: 金币+10 2012-12-06 17:04:07
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与，欢迎常来 2012-12-07 08:06:25
你可以尝试一下在96孔板中复苏一下，待细胞长起来后在转回到瓶中，可能你本身活的细胞就不是很多，直接在瓶中复苏的话不容易活。
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2楼2012-12-06 10:39:25
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love2412

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
why0393: 金币+10 2012-12-06 17:06:08
wizardfan: 金币+1, 谢谢分享经验 2012-12-07 08:06:42
刚复苏时的活性、密度是多少？要保证活细胞的密度。活性实在太低的话试下梯度离心分离活细胞，或者像2L说的那样用微孔板（还可以加滋养细胞）。至于污染问题，复苏初期影响不大的。
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3楼2012-12-06 11:30:01
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why0393

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yongliqin at 2012-12-06 10:39:25
你可以尝试一下在96孔板中复苏一下，待细胞长起来后在转回到瓶中，可能你本身活的细胞就不是很多，直接在瓶中复苏的话不容易活。

嗯，正有此意！多谢多谢！
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12345
4楼2012-12-06 17:03:59
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