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weilinji2011

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于细胞毒性实验!

我们初步打算建立一个细胞毒性检测的实验室,需要培养细胞,我们只是做一些简单的MTT实验,或者SRB、CCK等,细胞用L929成纤维细胞。离心机是不是用普通的4000r/min就行,不需要什么冷冻高速的离心机?L929细胞的储存条件是什么?用得上-80度冰箱吗?我不是学生物的,请各位多指点一下
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western虫

金虫 (小有名气)

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★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 很好的回复! 2012-09-19 13:36:30
离心机1000r就够了,不需要冷冻高速离心机吧,细胞冻存要在-80冰箱,-80是短期冻存,要长期冻存要保存在液氮。
ForDream!
2楼2012-09-19 12:41:50
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weilinji2011

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by western虫 at 2012-09-19 12:41:50
离心机1000r就够了,不需要冷冻高速离心机吧,细胞冻存要在-80冰箱,-80是短期冻存,要长期冻存要保存在液氮。

我们坐牙科材料的,一般用L929小鼠成纤维细胞,细胞株买回来后是不是需要存储在-80度冰箱然后液氮罐?
111
3楼2012-09-19 14:20:27
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western虫

金虫 (小有名气)

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wizardfan: 金币+1, 谢谢分享经验 2012-09-21 06:53:32
细胞冻存要一步一步来,用甘油或者二甲基亚砜,先在4度放个半个小时到一个小时,然后-20度放个半小时到两个小时,再放到-80度过夜,然后转移到液氮长期保存。-80可以保存一段时间,液氮可以保存很长时间
ForDream!
4楼2012-09-20 16:01:53
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-09-21 06:53:14
楼主新买回来的细胞应该先复苏培养把,等到细胞长到一定密度后,再冻存比较合适
愿与你携手,沿河看柳
5楼2012-09-20 19:15:02
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wzqno

金虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与,能不能解释下为什么不用-80冰箱 2012-09-21 06:53:03
首先得有个细胞房,还得有个液氮罐,二氧化碳培养箱得有吧,除非你每次都买新的细胞,离心机得是可以离96孔板的,最好可以换转子,还可以离50ml离心管,转速嘛,4000rpm足矣,再有个酶标仪ELX800就可以了。-80冰箱可以不用
6楼2012-09-20 22:32:03
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wzqno

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
wizardfan: 金币+3, 谢谢合作 2012-09-23 07:35:03
-80冰箱有的话固然很好,如果没有,在冻细胞的时候现在液氮罐中不接触液氮的地方放置数小时,在沉入液氮中也会有相同的效果。-80冰箱只能短期保存细胞,半年到一年可以,再长就不能保证了
7楼2012-09-21 14:16:38
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weilinji2011

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wzqno at 2012-09-21 14:16:38
-80冰箱有的话固然很好,如果没有,在冻细胞的时候现在液氮罐中不接触液氮的地方放置数小时,在沉入液氮中也会有相同的效果。-80冰箱只能短期保存细胞,半年到一年可以,再长就不能保证了

国产的低速台式离心机好用吗?
111
8楼2012-09-22 10:00:43
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wzqno

金虫 (小有名气)

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wizardfan: 金币+1, 很耐心 2012-09-23 07:35:20
引用回帖:
8楼: Originally posted by weilinji2011 at 2012-09-22 10:00:43
国产的低速台式离心机好用吗?...

我们实验室有个湘仪的离心机,用着还行,你要是需要离心96孔板的话,最好买beckman
9楼2012-09-22 21:48:11
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0614after

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不需要超低温冰箱,离心的时候1000转就够了。设备最好买进口的,精度高,尤其是酶标仪。
10楼2013-10-27 16:21:10
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