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未末

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于细胞毒性MTT实验

求助各位大虾!!
    事实:最近在做A549细胞的阿霉素毒性实验的时候,发现加入MTT后形成的甲瓒很少,但是同样数量的A2780细胞能形成很多的甲瓒。
    问题:是不是A549细胞毒性实验不适合选择MTT进行评价?如果不适合的话,有其他的评价方法吗?
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wyj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


westzilch(金币+1): 谢谢交流! 2011-07-25 12:17:06
未末(金币+2): 恩,好的 2011-09-04 12:04:55
加阿霉素后MTT形成的很少,如果阴性对照(加细胞不加药)OD值大于0.7,那就说明是该细胞对阿霉素更敏感,应降低药物浓度,再做量效曲线;如阴性对照OD值也很低,说明你的细胞数不够,排除计数错误,极可能是生长状态不好。
4楼2011-07-24 20:57:19
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wyj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


qinhy(金币+1): 多谢回帖交流~ 2012-01-29 19:36:00
正确的方法是减少药物浓度,重做量效曲线。不知你用的阿霉素浓度是多少?太大了肯定不行。
6楼2011-07-25 12:12:38
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普通回帖

yjxwtc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-07-22 00:04:16
未末(金币+1): 谢谢!!! 2011-09-04 12:04:27
甲瓒数量与存活细胞数量成正比的,同等剂量下,A549细胞形成的甲瓒少,证明A549细胞相比A2780细胞对阿霉素更为敏感,不能说就不适合MTT评价,你应该根据你的试验目的选择试验方法和细胞株,不能如此鲁莽。
2楼2011-07-21 23:46:49
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elescaller

铁杆木虫 (知名作家)

铁杆木虫 (无名作家)

我是进来学习的
3楼2011-07-22 17:22:53
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未末

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wyj at 2011-07-24 20:57:19:
加阿霉素后MTT形成的很少,如果阴性对照(加细胞不加药)OD值大于0.7,那就说明是该细胞对阿霉素更敏感,应降低药物浓度,再做量效曲线;如阴性对照OD值也很低,说明你的细胞数不够,排除计数错误,极可能是生长状 ...

control组48小时镜检细胞已经长满,但是测得的吸光度仍然只有0.4-0.5,求问除了换实验方法,还有什么解决办法吗?谢谢~~
5楼2011-07-25 11:09:25
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xiangf

金虫 (小有名气)

我是进来学习的
7楼2011-08-19 22:27:54
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
8楼2012-01-28 17:52:15
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anliang

金虫 (正式写手)


MTT试验时,为什么选择DMSO作阳性对照?
个人理解:MTT试验是测试细胞的相对增殖抑制的,而DMSO是破坏细胞膜的。所以从原理上说是不一样的
难道只是考虑结果吗(细胞的数目)
愿同各位大侠探讨
(近来较关注纳米材料的细胞毒检测方法?)
9楼2012-04-01 10:04:16
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limeiquan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1597418楼: Originally posted by anliang at 2012-04-01 10:04:16
MTT试验时,为什么选择DMSO作阳性对照?
个人理解:MTT试验是测试细胞的相对增殖抑制的,而DMSO是破坏细胞膜的。所以从原理上说是不一样的
难道只是考虑结果吗(细胞的数目)
愿同各位大侠探讨
(近来较关注纳米 ...

你这个问题这么久了没人回答,在下也是初学者,在MTT实验中DMSO应该是作为溶剂溶解甲瓒的吧,当然它要能破坏细胞膜才行。
把自己的知识和经验拿来分享是件快乐的事情,你愿意,我也愿意,所以我们可以说是互为良师益友。
10楼2013-02-21 17:10:28
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