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未末

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于细胞毒性MTT实验

求助各位大虾！！
    事实：最近在做A549细胞的阿霉素毒性实验的时候，发现加入MTT后形成的甲瓒很少，但是同样数量的A2780细胞能形成很多的甲瓒。
    问题：是不是A549细胞毒性实验不适合选择MTT进行评价？如果不适合的话，有其他的评价方法吗？
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1楼 2011-07-21 16:33:54
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未末

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by wyj at 2011-07-24 20:57:19:
加阿霉素后MTT形成的很少，如果阴性对照（加细胞不加药）OD值大于0.7，那就说明是该细胞对阿霉素更敏感，应降低药物浓度，再做量效曲线；如阴性对照OD值也很低，说明你的细胞数不够，排除计数错误，极可能是生长状 ...

control组48小时镜检细胞已经长满，但是测得的吸光度仍然只有0.4-0.5，求问除了换实验方法，还有什么解决办法吗？谢谢~~
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5楼2011-07-25 11:09:25
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yjxwtc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢！ 2011-07-22 00:04:16
未末(金币+1): 谢谢！！！ 2011-09-04 12:04:27
甲瓒数量与存活细胞数量成正比的，同等剂量下，A549细胞形成的甲瓒少，证明A549细胞相比A2780细胞对阿霉素更为敏感，不能说就不适合MTT评价，你应该根据你的试验目的选择试验方法和细胞株，不能如此鲁莽。
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2楼2011-07-21 23:46:49
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wyj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
westzilch(金币+1): 谢谢交流！ 2011-07-25 12:17:06
未末(金币+2): 恩，好的 2011-09-04 12:04:55
加阿霉素后MTT形成的很少，如果阴性对照（加细胞不加药）OD值大于0.7，那就说明是该细胞对阿霉素更敏感，应降低药物浓度，再做量效曲线；如阴性对照OD值也很低，说明你的细胞数不够，排除计数错误，极可能是生长状态不好。
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4楼2011-07-24 20:57:19
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wyj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
qinhy(金币+1): 多谢回帖交流~ 2012-01-29 19:36:00
正确的方法是减少药物浓度，重做量效曲线。不知你用的阿霉素浓度是多少？太大了肯定不行。
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6楼2011-07-25 12:12:38
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