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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物的细胞毒性问题
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右岸晴雨

铜虫 (初入文坛)

[求助] 药物的细胞毒性问题

用MTT法做药物的细胞毒性，寻找药物的最大无毒浓度，怎么处理数据，需要用什么软件吗？如何做？我运用公式计算药物对细胞的抑制率：抑制率=（正常细胞对照组OD值-加药组OD值）/正常细胞对照组OD值，我的药物都稀释到0.78mg/L了，抑制率还达不到0%，能不能说抑制率在10%以内就认为对细胞无毒性了呢？
还有一个问题，如何确定96孔板的铺板细胞密度呢？细胞太稀，OD值太小不行，细胞密度太大，会导致细胞长的过满，那么以一种什么形式去确定合适的细胞接种密度呢？
各位，如能给些建议，不胜感激！
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1楼 2011-07-07 13:55:56
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flesymgo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

右岸晴雨(金币+5): 2011-07-07 15:43:22
1.对于细胞密度的问题，每种细胞的大小和生长速度都不一样，建议先做一个不同密度细胞的空白试验，来确定最合适的浓度。
2.关于抑制率的问题，LZ计算没问题，有些药的毒性就是比较大，而且看到有些人说MTT的误差有可能在10%左右，所以，抑制率如果在10%以内基本可以说无明显毒性了。或者再稀释一些，我现在做的这个药就要稀释到0.5mg/L.建议稀释的比例放大些，可10倍或5倍的稀释，多做几个梯度，这样整体的趋势就会比较明显，另外n要大于5。
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做现在能做的,想现在该想的.
2楼2011-07-07 14:24:38
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右岸晴雨

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by flesymgo at 2011-07-07 14:24:38:
1.对于细胞密度的问题，每种细胞的大小和生长速度都不一样，建议先做一个不同密度细胞的空白试验，来确定最合适的浓度。
2.关于抑制率的问题，LZ计算没问题，有些药的毒性就是比较大，而且看到有些人说MTT的误差 ...

谢谢您给的意见，
麻烦再问一下，做不同密度细胞的空白实验来确定最合适的浓度，是不是就简单看一下细胞有没有长满？还是具体怎么做？我有看到说为了保证实验结果的线性，MTT实验的吸光值最好在0-0.7范围内，这个跟细胞接种密度有关系吧？
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3楼2011-07-07 15:43:04
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flesymgo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by 右岸晴雨 at 2011-07-07 15:43:04:
谢谢您给的意见，
麻烦再问一下，做不同密度细胞的空白实验来确定最合适的浓度，是不是就简单看一下细胞有没有长满？还是具体怎么做？我有看到说为了保证实验结果的线性，MTT实验的吸光值最好在0-0.7范围内， ...

对，吸光度肯定是跟细胞密度有关的。不光要看细胞有没有长满（最好是不要长太满）还要用MTT法测一下吸光度，在0.2-0.8之间，线性是最好的。
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做现在能做的,想现在该想的.
4楼2011-07-08 16:32:15
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