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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】跪求用alamar blue检测hl60细胞毒性的方法
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xiaohei504888

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】跪求用alamar blue检测hl60细胞毒性的方法 已有3人参与

各位大虾，小女子跪求用alamar blue检测hl60细胞毒性的方法。
我是细胞实验方面的新手，现导师要求我用hl60筛选细胞毒性，用alamar blue的方法。我做了2次了，都是颜色变化不大。
具体实验是这样做的： 细胞播种10×4个在96孔板，加入我的提取物24，48，72小时后
用酶标仪测吸光值。测吸光值之前6小时，加入alamar blue。即便是72小时候，颜色变化都不大，基本还是蓝色。这样无法计算细胞毒性。我的提取物是没有问题的，在做其他的细胞筛选是都显示出了良好的细胞毒性。
我不知道为什么颜色没有变化，跪求有相同实验经验的大虾指教。
如能帮我解决问题，即送30金币。
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1楼 2010-07-20 20:11:50
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+7):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-07-20 23:47:24
xiaohei504888(金币+15): 2010-07-22 10:50:23
本帖内容被屏蔽
2楼2010-07-20 22:43:24
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xiaohei504888

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-07-20 22:43:24:
个人猜测原因可能有两个方面：
一. alamar blue与细胞孵育的时间不够。参见alamar blue使用说明：
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。   
    2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量 ...

我估计像大虾写的那样，是加了alamar blue 后孵育时间不够，我不是用荧光检测吸光值，而孵育时间只有6小时。谢谢我先去测试一下，看加了alamar blue后孵育时间增加到24小时，数据如何。如果不对的话，还要继续向大虾请教
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3楼2010-07-22 10:49:51
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看天

木虫 (知名作家)
回帖要想henkally
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
4楼2010-07-22 12:19:48
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Super_M

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
641499楼: Originally posted by xiaohei504888 at 2010-07-20 20:11:50:
各位大虾，小女子跪求用alamar blue检测hl60细胞毒性的方法。
我是细胞实验方面的新手，现导师要求我用hl60筛选细胞毒性，用alamar blue的方法。我做了2次了，都是颜色变化不大。
具体实验是这样做的： 细胞播种 ...

请问做Alamar-Blue的时候，标曲是怎么做的？
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5楼2012-05-03 18:30:43
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