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xiaohei504888

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】跪求用alamar blue检测hl60细胞毒性的方法已有3人参与

各位大虾,小女子跪求用alamar blue检测hl60细胞毒性的方法。
我是细胞实验方面的新手,现导师要求我用hl60筛选细胞毒性,用alamar blue的方法。我做了2次了,都是颜色变化不大。
具体实验是这样做的: 细胞播种10×4个在96孔板,加入我的提取物24,48,72小时后
用酶标仪测吸光值。测吸光值之前6小时,加入alamar blue。即便是72小时候,颜色变化都不大,基本还是蓝色。这样无法计算细胞毒性。我的提取物是没有问题的,在做其他的细胞筛选是都显示出了良好的细胞毒性。
我不知道为什么颜色没有变化,跪求有相同实验经验的大虾指教。
如能帮我解决问题,即送30金币。
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xiaohei504888

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-07-20 22:43:24:
个人猜测原因可能有两个方面:
一. alamar blue与细胞孵育的时间不够。参见alamar blue使用说明:
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。   
    2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量 ...

我估计像大虾写的那样,是加了alamar blue 后孵育时间不够,我不是用荧光检测吸光值,而孵育时间只有6小时。谢谢我先去测试一下,看加了alamar blue后孵育时间增加到24小时,数据如何。如果不对的话,还要继续向大虾请教
3楼2010-07-22 10:49:51
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