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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于细胞毒性实验！
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weilinji2011

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于细胞毒性实验！

我们初步打算建立一个细胞毒性检测的实验室，需要培养细胞，我们只是做一些简单的MTT实验，或者SRB、CCK等，细胞用L929成纤维细胞。离心机是不是用普通的4000r/min就行，不需要什么冷冻高速的离心机？L929细胞的储存条件是什么？用得上-80度冰箱吗？我不是学生物的，请各位多指点一下
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111
1楼 2012-09-19 11:05:59
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 很好的回复！ 2012-09-19 13:36:30
离心机1000r就够了，不需要冷冻高速离心机吧，细胞冻存要在-80冰箱，-80是短期冻存，要长期冻存要保存在液氮。
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ForDream！
2楼2012-09-19 12:41:50
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weilinji2011

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by western虫 at 2012-09-19 12:41:50
离心机1000r就够了，不需要冷冻高速离心机吧，细胞冻存要在-80冰箱，-80是短期冻存，要长期冻存要保存在液氮。

我们坐牙科材料的，一般用L929小鼠成纤维细胞，细胞株买回来后是不是需要存储在-80度冰箱然后液氮罐？
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111
3楼2012-09-19 14:20:27
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wizardfan: 金币+1, 谢谢分享经验 2012-09-21 06:53:32
细胞冻存要一步一步来，用甘油或者二甲基亚砜，先在4度放个半个小时到一个小时，然后-20度放个半小时到两个小时，再放到-80度过夜，然后转移到液氮长期保存。-80可以保存一段时间，液氮可以保存很长时间
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ForDream！
4楼2012-09-20 16:01:53
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-09-21 06:53:14
楼主新买回来的细胞应该先复苏培养把，等到细胞长到一定密度后，再冻存比较合适
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愿与你携手，沿河看柳
5楼2012-09-20 19:15:02
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与，能不能解释下为什么不用-80冰箱 2012-09-21 06:53:03
首先得有个细胞房，还得有个液氮罐，二氧化碳培养箱得有吧，除非你每次都买新的细胞，离心机得是可以离96孔板的，最好可以换转子，还可以离50ml离心管，转速嘛，4000rpm足矣，再有个酶标仪ELX800就可以了。-80冰箱可以不用
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6楼2012-09-20 22:32:03
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wzqno

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
wizardfan: 金币+3, 谢谢合作 2012-09-23 07:35:03
-80冰箱有的话固然很好，如果没有，在冻细胞的时候现在液氮罐中不接触液氮的地方放置数小时，在沉入液氮中也会有相同的效果。-80冰箱只能短期保存细胞，半年到一年可以，再长就不能保证了
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7楼2012-09-21 14:16:38
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weilinji2011

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wzqno at 2012-09-21 14:16:38
-80冰箱有的话固然很好，如果没有，在冻细胞的时候现在液氮罐中不接触液氮的地方放置数小时，在沉入液氮中也会有相同的效果。-80冰箱只能短期保存细胞，半年到一年可以，再长就不能保证了

国产的低速台式离心机好用吗？
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111
8楼2012-09-22 10:00:43
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wizardfan: 金币+1, 很耐心 2012-09-23 07:35:20
引用回帖:
8楼: Originally posted by weilinji2011 at 2012-09-22 10:00:43
国产的低速台式离心机好用吗？...

我们实验室有个湘仪的离心机，用着还行，你要是需要离心96孔板的话，最好买beckman
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9楼2012-09-22 21:48:11
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0614after

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不需要超低温冰箱，离心的时候1000转就够了。设备最好买进口的，精度高，尤其是酶标仪。
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10楼2013-10-27 16:21:10
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