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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求救293T细胞的复苏
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小周

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】求救293T细胞的复苏 已有7人参与

各位大侠，我第一次培养293T细胞，结果复苏时细胞贴不上壁，细胞飘着，估计死了。排除污染的因素。我冻存时用20%血清，10%DMSO，复苏时没有将DMSO去掉，直接加到培养基里面的。问一下，293t细胞对DMSO敏感吗？是否在复苏时要离心去掉DMSO啊！？？急死我了。谢谢了
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1楼 2010-05-15 09:24:11
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢分享经验~~ 2010-05-15 19:27:12
培养过3T3细胞，复苏时将DMSO浓度降低到1%以下是没有影响的，复苏的第二天重新更换培养基，不知能否作为参考？
也可能是冻存时出现的问题导致细胞活性不好
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愿与你携手，沿河看柳
2楼2010-05-15 18:04:16
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yinsongna

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
解冻细胞的时候都要用新培养液，冻存液都离心去除了
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3楼2010-05-15 19:59:24
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yinsongna

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
忘问你你的293贴多久你发现没贴上的
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4楼2010-05-15 20:00:30
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Temin2009

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-15 21:59:55
没事，一般是离心沉淀细胞，去除DMSO，换新鲜培养基悬浮。如果不除DMSO，直接培养，也没关系，这细胞生命力挺强。像你这种悬浮细胞多，贴壁少，是很经常的现象，你换新鲜培养基，然后放培养箱培养着，过几天就大多贴壁了。
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5楼2010-05-15 21:54:04
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ideal9268

铜虫 (小有名气)
★ ★
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plantaqp(金币+1):欢迎交流 2010-05-16 01:38:19
建议换新培养基试试，如果还不行，可能是冻存的时候就不好吧
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6楼2010-05-15 22:36:10
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能是没冻好，DMSO先除或是后除，关系不大
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7楼2010-05-17 02:23:29
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by yinsongna at 2010-05-15 20:00:30:
忘问你你的293贴多久你发现没贴上的

我第一天下午复苏的，第二天早上发现细胞没有贴壁。
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8楼2010-05-17 08:55:31
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by Temin2009 at 2010-05-15 21:54:04:
没事，一般是离心沉淀细胞，去除DMSO，换新鲜培养基悬浮。如果不除DMSO，直接培养，也没关系，这细胞生命力挺强。像你这种悬浮细胞多，贴壁少，是很经常的现象，你换新鲜培养基，然后放培养箱培养着，过几天就大多 ...

谢谢了。我再试试看
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9楼2010-05-17 08:56:39
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Temin2009 at 2010-05-15 21:54:04
没事，一般是离心沉淀细胞，去除DMSO，换新鲜培养基悬浮。如果不除DMSO，直接培养，也没关系，这细胞生命力挺强。像你这种悬浮细胞多，贴壁少，是很经常的现象，你换新鲜培养基，然后放培养箱培养着，过几天就大多贴 ...

你好，我今天上午传了下293T细胞，晚上来看时有些成块儿的黑色东西，看起来是细胞团在一起，想问下你们出现过这种情况吗？是污染吗
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10楼2014-06-08 21:10:10
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