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小周

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】求救293T细胞的复苏已有7人参与

各位大侠,我第一次培养293T细胞,结果复苏时细胞贴不上壁,细胞飘着,估计死了。排除污染的因素。我冻存时用20%血清,10%DMSO,复苏时没有将DMSO去掉,直接加到培养基里面的。问一下,293t细胞对DMSO敏感吗?是否在复苏时要离心去掉DMSO啊!??急死我了。谢谢了
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Temin2009 at 2010-05-15 21:54:04
没事,一般是离心沉淀细胞,去除DMSO,换新鲜培养基悬浮。如果不除DMSO,直接培养,也没关系,这细胞生命力挺强。像你这种悬浮细胞多,贴壁少,是很经常的现象,你换新鲜培养基,然后放培养箱培养着,过几天就大多贴 ...

你好,我今天上午传了下293T细胞,晚上来看时有些成块儿的黑色东西,看起来是细胞团在一起,想问下你们出现过这种情况吗?是污染吗
10楼2014-06-08 21:10:10
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢分享经验~~ 2010-05-15 19:27:12
培养过3T3细胞,复苏时将DMSO浓度降低到1%以下是没有影响的,复苏的第二天重新更换培养基,不知能否作为参考?
也可能是冻存时出现的问题导致细胞活性不好
愿与你携手,沿河看柳
2楼2010-05-15 18:04:16
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yinsongna

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
解冻细胞的时候都要用新培养液,冻存液都离心去除了
3楼2010-05-15 19:59:24
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yinsongna

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
忘问你你的293贴多久你发现没贴上的
4楼2010-05-15 20:00:30
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