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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 培养瓶细胞分布不均匀
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

[求助] 培养瓶细胞分布不均匀

各位亲，本人最近正在养前脂肪细胞，用的是225cm2的培养瓶，但是，每次传代后的第2天都发现细胞分别不均匀，总是培养瓶前部细胞密集，后部细胞稀疏，有的甚至只有极少数细胞，当然，我每次传代结束后可能没有将培养瓶内的细胞液充分摇晃均匀，但是，除此之外还有其他什么原因？？怎么样才能让细胞在培养瓶内分布均匀？？
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因为喜欢，所以担忧，所以后退
1楼 2012-10-01 10:46:43
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goingabroad
★
bjgymilyxz(金币+1): 谢谢参与
2楼2012-10-01 12:00:45
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米兰红黑魂

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我不是很了解这种细胞的生长特性，是不是需氧啊，有米有检查培养箱是不是有倾斜啊！！！
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人生如棋，我愿为卒，即便走的在慢，在艰难，你何曾看见我后退一步！！！
3楼2012-10-01 14:47:11
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 米兰红黑魂 at 2012-10-01 14:47:11
我不是很了解这种细胞的生长特性，是不是需氧啊，有米有检查培养箱是不是有倾斜啊！！！

应该没有倾斜吧。复苏之后的细胞分布还不错，传了1次代后就变得不均匀了
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4楼2012-10-01 17:34:46
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 米兰红黑魂 at 2012-10-01 14:47:11
我不是很了解这种细胞的生长特性，是不是需氧啊，有米有检查培养箱是不是有倾斜啊！！！

前脂肪细胞贴壁后形态像成纤维细胞，呈长梭形。但是，现在细胞稀少的区域内有的细胞出现“太阳花”似的形态，不知道是不是污染啊？
可千万别污染，不然又要重新培养好久才能开始正式实验
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5楼2012-10-01 18:21:09
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米兰红黑魂

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-01 20:11:27
你这个前脂肪细胞是原代啊 还是细胞株啊，细胞长的速度怎么样啊，如果在相差显微镜下，还是“太阳花”似的形态，也就是树突状，而且细胞表面附着颗粒，我觉得像是分化了。细胞表形改变啦，有米有发现现在胰酶消化的时间较之前有改变啊！！！
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人生如棋，我愿为卒，即便走的在慢，在艰难，你何曾看见我后退一步！！！
6楼2012-10-01 19:58:13
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wangyan2011

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是胰酶消化的时候没有消化好，如果这样的话，吹打也吹打不均匀。还要看 细胞的生长状态。
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feixiang
7楼2012-10-02 08:07:14
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 米兰红黑魂 at 2012-10-01 19:58:13
你这个前脂肪细胞是原代啊 还是细胞株啊，细胞长的速度怎么样啊，如果在相差显微镜下，还是“太阳花”似的形态，也就是树突状，而且细胞表面附着颗粒，我觉得像是分化了。细胞表形改变啦，有米有发现现在胰酶消化的 ...

1.是细胞株的。
2. 细胞密集的区域，生长速度挺快，挺正常的。但是，细胞极其稀少的区域才出现树突状。
3. 是不是胰酶消化时间太长了？？从加入胰酶，到最终DMEM终止，可能有5min
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8楼2012-10-02 08:50:56
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wangyan2011 at 2012-10-02 08:07:14
是不是胰酶消化的时候没有消化好，如果这样的话，吹打也吹打不均匀。还要看 细胞的生长状态。

你的意思是消化过了，还是没有充分消化？
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9楼2012-10-02 08:51:50
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科学先生

银虫 (正式写手)
你怎么用这么大的瓶子培养，还是写错了。可能和你瓶子本身的性质有关系
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10楼2012-10-02 10:26:44
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