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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

[求助] 培养瓶细胞分布不均匀

各位亲,本人最近正在养前脂肪细胞,用的是225cm2的培养瓶,但是,每次传代后的第2天都发现细胞分别不均匀,总是培养瓶前部细胞密集,后部细胞稀疏,有的甚至只有极少数细胞,当然,我每次传代结束后可能没有将培养瓶内的细胞液充分摇晃均匀,但是,除此之外还有其他什么原因??怎么样才能让细胞在培养瓶内分布均匀??
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因为喜欢,所以担忧,所以后退
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 米兰红黑魂 at 2012-10-01 19:58:13
你这个前脂肪细胞是原代啊 还是细胞株啊,细胞长的速度怎么样啊,如果在相差显微镜下,还是“太阳花”似的形态,也就是树突状,而且细胞表面附着颗粒,我觉得像是分化了。细胞表形改变啦,有米有发现现在胰酶消化的 ...

1.是细胞株的。
2. 细胞密集的区域,生长速度挺快,挺正常的。但是,细胞极其稀少的区域才出现树突状。
3. 是不是胰酶消化时间太长了??从加入胰酶,到最终DMEM终止,可能有5min
因为喜欢,所以担忧,所以后退
8楼2012-10-02 08:50:56
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米兰红黑魂

木虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我不是很了解这种细胞的生长特性,是不是需氧啊,有米有检查培养箱是不是有倾斜啊!!!
人生如棋,我愿为卒,即便走的在慢,在艰难,你何曾看见我后退一步!!!
3楼2012-10-01 14:47:11
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 米兰红黑魂 at 2012-10-01 14:47:11
我不是很了解这种细胞的生长特性,是不是需氧啊,有米有检查培养箱是不是有倾斜啊!!!

应该没有倾斜吧。复苏之后的细胞分布还不错,传了1次代后就变得不均匀了
因为喜欢,所以担忧,所以后退
4楼2012-10-01 17:34:46
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 米兰红黑魂 at 2012-10-01 14:47:11
我不是很了解这种细胞的生长特性,是不是需氧啊,有米有检查培养箱是不是有倾斜啊!!!

前脂肪细胞贴壁后形态像成纤维细胞,呈长梭形。但是,现在细胞稀少的区域内有的细胞出现“太阳花”似的形态,不知道是不是污染啊?
可千万别污染,不然又要重新培养好久才能开始正式实验
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5楼2012-10-01 18:21:09
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