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【求助/交流】求救293T细胞的复苏
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小周
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[交流]
【求助/交流】求救293T细胞的复苏
已有7人参与
各位大侠,我第一次培养293T细胞,结果复苏时细胞贴不上壁,细胞飘着,估计死了。排除污染的因素。我冻存时用20%血清,10%DMSO,复苏时没有将DMSO去掉,直接加到培养基里面的。问一下,293t细胞对DMSO敏感吗?是否在复苏时要离心去掉DMSO啊!??急死我了。谢谢了
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【求助/交流】293T细胞培养求助
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1楼
2010-05-15 09:24:11
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yinsongna
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解冻细胞的时候都要用新培养液,冻存液都离心去除了
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3楼
2010-05-15 19:59:24
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liyangmiscap
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lstt09nk(金币+1):感谢分享经验~~ 2010-05-15 19:27:12
培养过3T3细胞,复苏时将DMSO浓度降低到1%以下是没有影响的,复苏的第二天重新更换培养基,不知能否作为参考?
也可能是冻存时出现的问题导致细胞活性不好
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愿与你携手,沿河看柳
2楼
2010-05-15 18:04:16
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yinsongna
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忘问你你的293贴多久你发现没贴上的
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4楼
2010-05-15 20:00:30
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Temin2009
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scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-15 21:59:55
没事,一般是离心沉淀细胞,去除DMSO,换新鲜培养基悬浮。如果不除DMSO,直接培养,也没关系,这细胞生命力挺强。像你这种悬浮细胞多,贴壁少,是很经常的现象,你换新鲜培养基,然后放培养箱培养着,过几天就大多贴壁了。
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5楼
2010-05-15 21:54:04
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