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彩虹岛

新虫 (初入文坛)

[求助] 急!请大家看看我们养的K562细胞和Ramos细胞怎么了?

求助大家一下,每次复苏细胞后,细胞都呈现这种状态,视野里面细胞碎片均匀分布,少数活细胞飘散在上面,经过几次换液,细胞碎片依然存在,然后细胞慢慢就死了,这已经出现很长一段时间了。我复苏的两种细胞都是这样,希望各位能给我指点迷津,救救啊!

























[ Last edited by 彩虹岛 on 2012-5-8 at 10:20 ]
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一:当初你冻存细胞的时候有没有问题,如果是冻存的时候就出了问题,再怎么复苏也是养不好的!
第二:你复苏的时候操作出问题没?从液氮拿出是否在37°水浴中快速溶解,复苏的操作过程不当也可能导致碎片很多!
其实这两种细胞都挺好养的,之前我们实验室也是由于冻存的时候出了问题,一直养和你的情况差不多,后来从一级细胞库复苏就OK了,所以你要看看是否冻存出了问题!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

我就是我
2楼2012-05-08 10:21:51
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彩虹岛

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by wtyyyyy1988 at 2012-05-08 10:21:51:
第一:当初你冻存细胞的时候有没有问题,如果是冻存的时候就出了问题,再怎么复苏也是养不好的!
第二:你复苏的时候操作出问题没?从液氮拿出是否在37°水浴中快速溶解,复苏的操作过程不当也可能导致碎片很多! ...

啊,这种情况下细胞就是救不活了?
3楼2012-05-08 10:29:25
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 彩虹岛 at 2012-05-08 10:29:25:
啊,这种情况下细胞就是救不活了?

要是冻存出了问题,那就确实很难再养活,要不你一开始加20%的血清试试
我就是我
4楼2012-05-08 12:23:02
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彩虹岛

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wtyyyyy1988 at 2012-05-08 12:23:02:
要是冻存出了问题,那就确实很难再养活,要不你一开始加20%的血清试试

恩,知道啦,谢谢啊,我再试试
5楼2012-05-08 15:51:19
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vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不太好判断。
冻存管里面有没有乙醇残留?要是有,补充一点:在-80℃阶段的时候,尽量不要让让乙醇没过管子;有些国产冻存管很不好,漏进乙醇的话,细胞死得可能会很厉害。
6楼2012-05-09 16:34:21
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yufuxian

木虫 (著名写手)

是不是培养基或是血清的问题,可以换些好的血清试试
7楼2012-05-09 17:38:46
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zhang304

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看看是不是血清的问题。之前也有同学遇到这种情况,建议查查别人冻存这些细胞用的是哪种血清,你复苏时尽量用一样的培养基和血清。
8楼2012-05-09 20:50:10
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彩虹岛

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by vir2008 at 2012-05-09 16:34:21:
不太好判断。
冻存管里面有没有乙醇残留?要是有,补充一点:在-80℃阶段的时候,尽量不要让让乙醇没过管子;有些国产冻存管很不好,漏进乙醇的话,细胞死得可能会很厉害。

我冻存的时候没有用乙醇,直接是培养液加二甲基亚砜
9楼2012-05-10 09:53:05
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彩虹岛

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by zhang304 at 2012-05-09 20:50:10:
看看是不是血清的问题。之前也有同学遇到这种情况,建议查查别人冻存这些细胞用的是哪种血清,你复苏时尽量用一样的培养基和血清。

恩,明白!
10楼2012-05-10 09:53:28
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