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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 急！请大家看看我们养的K562细胞和Ramos细胞怎么了？
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彩虹岛

新虫 (初入文坛)

[求助] 急！请大家看看我们养的K562细胞和Ramos细胞怎么了？

求助大家一下，每次复苏细胞后，细胞都呈现这种状态，视野里面细胞碎片均匀分布，少数活细胞飘散在上面，经过几次换液，细胞碎片依然存在，然后细胞慢慢就死了，这已经出现很长一段时间了。我复苏的两种细胞都是这样，希望各位能给我指点迷津，救救啊！

























[ Last edited by 彩虹岛 on 2012-5-8 at 10:20 ]
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1楼 2012-05-08 10:11:37
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vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不太好判断。
冻存管里面有没有乙醇残留？要是有，补充一点：在-80℃阶段的时候，尽量不要让让乙醇没过管子；有些国产冻存管很不好，漏进乙醇的话，细胞死得可能会很厉害。
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6楼2012-05-09 16:34:21
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一：当初你冻存细胞的时候有没有问题，如果是冻存的时候就出了问题，再怎么复苏也是养不好的！
第二：你复苏的时候操作出问题没？从液氮拿出是否在37°水浴中快速溶解，复苏的操作过程不当也可能导致碎片很多！
其实这两种细胞都挺好养的，之前我们实验室也是由于冻存的时候出了问题，一直养和你的情况差不多，后来从一级细胞库复苏就OK了，所以你要看看是否冻存出了问题！
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彩虹岛
我就是我
2楼2012-05-08 10:21:51
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彩虹岛

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by wtyyyyy1988 at 2012-05-08 10:21:51:
第一：当初你冻存细胞的时候有没有问题，如果是冻存的时候就出了问题，再怎么复苏也是养不好的！
第二：你复苏的时候操作出问题没？从液氮拿出是否在37°水浴中快速溶解，复苏的操作过程不当也可能导致碎片很多！ ...

啊，这种情况下细胞就是救不活了？
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3楼2012-05-08 10:29:25
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 彩虹岛 at 2012-05-08 10:29:25:
啊，这种情况下细胞就是救不活了？

要是冻存出了问题，那就确实很难再养活，要不你一开始加20%的血清试试
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我就是我
4楼2012-05-08 12:23:02
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