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zhaiaguan

金虫 (初入文坛)

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[求助] 碱基序列一样，在大肠杆菌里表达的蛋白大小不一样是怎么回事？已有4人参与

从模板细菌基因组里PCR出的基因片段，连接到pet32a载体上，在BL21(DE3)表达，质粒测序一模一样，表达出的蛋白一个和预期大小一致，另外一个却比预期的大了近一倍，是怎么回事？谢谢！

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1楼 2015-03-04 11:13:10

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zhaiaguan

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引用回帖:

6楼: Originally posted by 独行的小凉 at 2015-03-06 11:02:16
SDS-PAGE有还原非还原之分，区别在于buffer里是不是加了巯基乙醇或是二硫苏糖醇，作用打开分子内或是分子间的二硫键。如果是非还原电泳，有可能是因为分子间二硫键错配等原因形成了二聚体，楼主不妨试试还原电泳~...

样品里我加了有β-巯基乙醇的